IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación de la citotoxicidad y la topografía de matrices de quitosano para el confinamiento de ácido fólico
Autor/es:
REGINA DE MATTEO; VICTORIA A. GOMEZ ANDRADE; PEREZ OSCAR E.
Lugar:
Gualeguaychú, Entree Ríos
Reunión:
Congreso; III Congreso de Bromatología y Nutrición; 2019
Institución organizadora:
Universidad Nacional de Entre Ríos
Resumen:
El quitosano (Q) es un derivado de la quitina obtenido mediante un proceso de desacetilación. Es un polímero ampliamente utilizado como agente encapsulante por ser no tóxico, biodegradable y biocompatible. El costo de dicho polímero purificado es elevado siendo baja la viabilidad en la aplicación industrial, por lo cual se evalúa la posibilidad de emplear como agente encapsulante Q producido en la Argentina. El ácido fólico (AF) es una vitamina esencial en mujeres en edad reproductiva ya que está asociada con la disminución de defectos en el tubo neural del feto. Esta vitamina es incorporada a través de la dieta y debido a que es sensible a factores ambientales asociados al procesamiento de alimentos, se evalúa la metodología de nano-encapsulación con el objetivo de protegerla. La línea celular Caco-2 es una línea continua de células de adenocarcinoma colorectal epitelial humano, utilizada para la evaluación de la permeabilidad gastrointestinal in vitro. El objetivo del presente trabajo es evaluar el efecto citotóxico y de viabilidad celular de soluciones mixtas de Q-AF en un modelo de epitelio intestinal, así como también evaluar la topografía que estas soluciones presentan. Se prepararon soluciones stock de AF 1% p/p en agua ultrapura. Se emplearon Q argentino (264 KDa) y Q Sigma Aldrich (50-190 KDa) para obtener soluciones 1% p/p (pH= 5,5-6). Se diluyeron con Buffer Tris-HCl 10mM (pH= 7,4). Se generaron las soluciones mixtas de Q-AF mezclando iguales volúmenes de soluciones doblemente concentradas. Se evaluó la supervivencia y la proliferación celular mediante el ensayo de MTT, que permite determinar la funcionabilidad mitocondrial de las células tratadas. Se sembraron 2.104 células Caco-2 por well en placas de 96 wells y se pre-incubaron por 24 horas. Se realizaron tratamientos durante 48 horas en concentraciones variables de AF (0,05-1,5 ug/ml), de Q de alto y de bajo peso molecular (50-1000 ug/ml) y de los complejos de ambos Q (250 ug/ml) con AF (0,05-1,5 ug/ml). Los resultados indicaron que las células aumentan significativamente su proliferación al ser incubadas con los tratamientos de Q-AF respecto al control. La topografía de los sistemas estudiados fue obtenida por Microscopía de Fuerza Atómica en modo tapping. Para lograr definirla fue necesario depositar en forma de gota sobre silicio soluciones de AF (2 ug/ml), de Q Sigma Aldrich (5 ug/ml), de Q argentino (10 ug/ml) y de las soluciones mixtas Q-AF a las mismas concentraciones. Las imágenes de las soluciones muestran la presencia de estructuras agregadas para el AF y estructuras amorfas correspondientes al Q. Las estructuras del AF presentaron una altura y tamaño menor y un aspecto más disperso al estar entrampadas en la matriz de Q. Los resultados indican que la actividad de los complejos Q-AF es favorable en la proliferación celular y que la distribución del AF es equivalente tanto en Q de alto como de bajo peso molecular.