HNO y micobacterias: Un nuevo candidato para la lucha contra la tuberculosis

ESTEFANIA URDANIZ; MARCELO MARTÍ; MARIANO PRADO ACOSTA; SEBASTIAN SUAREZ; JORDANA GALIZIA; FEDERICO ISSOGLIO; MARIANA PIURI

Santiago de Chile

Congreso; XI SLAMTB 2018; 2018

El nitroxilo (HNO) es una especie altamente reactiva que recientemente ha cobrado relevancia en el campo de la medicina. Biológicamente el HNO tiene numerosos blancos, como las metaloproteínas o los tioles, y es fácilmente interconvertible a otras especies reactivas de oxígeno y nitrógeno (RNOS), generando un ambiente de estrés nitro-oxidativo. Mycobacterium tuberculosis, es sensible a RNOS, y por eso resulta interesante y novedoso evaluar la interacción entre el HNO y las micobacterias.En este trabajo evaluamos, en primer lugar, la viabilidad y respuesta biológica de micobacterias frente a compuestos dadores de HNO. Se observó que el mismo presenta un efecto micobactericida para M. smegmatis y también para M. tuberculosis, tanto en dosis únicas de dador como con dosis sucesivas de menor concentración. Además analizamos la interacción del HNO con diversos antibióticos observando dos efectos: una interacción positiva para la rifampicina, kanamicina y delamanid. Y una interacción negativa o antagónica con la isoniazida y el etambutol.En segundo lugar, estudiamos la reactividad de la proteína AhpE, una peroxirredoxina dependiente de tioles - cuyo sitio activo presenta una cisteína - y forma parte del sistema de defensa antioxidante del bacilo. Se observó que, en presencia de NO gaseoso, se forma HNO y se consume por completo al cabo de 15 minutos. En ese tiempo, el estado de oxidación del tiol aumenta, formándose ácido sulfénico (detectado por fluorescencia) y alcanzando la concentración máxima en el lapso mencionado lo cual coincide con una disminución en la concentración de tioles libres (medidos por una reacción con DTNB).Respecto de un posible mecanismo de acción del HNO, basándonos en ensayos realizados con fluoromicobacteriófagos reporteros, se propone que el HNO actúa interfiriendo con la fisiología general de las micobacterias. Esto sería consistente con la interconversión de NO a HNO observada y la multiplicidad de blancos que dichas especies pueden ?atacar?.