IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
La SUMOilación de Akt es requerida para la inducción del promotor de Nanog en células madre embrionarias
Autor/es:
FRANCIA, M.; VAZQUEZ ECHEGARAY C.; COSENTINO S.; SOLARI C.; PETRONE, MV.; TORO, A.; WAISMAN, A.; GUBERMAN, A.; BARAÑAO L.
Lugar:
Chascomús
Reunión:
Taller; IV Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2018
Institución organizadora:
IIB-INTECH
Resumen:
Las células madre embrionarias (CME) son células derivadas del macizo celular interno de blastocistos. Tienen la capacidad de autorrenovarse indefinidamente y de diferenciarse a tipos celulares de las tres capas germinales. Este estado pluripotente es mantenido en parte por el Factor Inhibidor de la Leucemia (LIF) incluido en el medio de cultivo que contiene además suero fetal bovino. La vía de PI3K/AKT es activada por LIF y es crucial para el mantenimiento de la expresión y actividad de los factores de transcripciones fundamentales en CME, Oct4, Sox2 y Nanog. En los últimos años fue reportado que la SUMOilacion de Akt1 regula la actividad de esta quinasa, con consecuencias directas en el patrón de splicing, crecimiento celular y supervivencia en diferentes líneas celulares. Sin embargo, el rol de esta modificación post-traduccional (MPT) de Akt1 aún no ha sido estudiada en CME. Nuestra hipótesis postula que la SUMOilacion de Akt1 es relevante para el mantenimiento de las propiedades fundamentales de CME. El objetivo del presente trabajo es estudiar el efecto de dicha MPT de Akt1 sobre la actividad del promotor de Nanog. Para ello co-transfectamos CME con vectores de expresión de variantes de Akt1 con diferente capacidad de ser SUMOiladas junto con un vector reportero del sistema Luciferasa controlado por el promotor de Nanog. Para el análisis estadístico utilizamos Modelos Lineales Mixtos. Observamos que las variantes de Akt1 que pueden ser SUMOiladas inducen la actividad de este promotor, mientras que este efecto no se observa con aquellas variantes cuya SUMOilacion se ve disminuida. Esto sugiere que la SUMOilacion de Akt1 es importante para la inducción de Nanog. Con el propósito de estudiar el mecanismo molecular involucrado, analizamos la posible participación de GSK3-B, STAT3 y p53. Para ello realizamos tratamientos con 2i, ausencia de LIF o utilizamos una línea celular de CME p53 knockout, generada en nuestro laboratorio. Nuestros resultados sugieren que ninguno de estos factores seria mediador del efecto encontrado. Actualmente nos encontramos estudiando otros posibles intermediarios involucrados.