Rol de la PKA en la respuesta traduccional frente estrés térmico en Saccharomyces cerevisiae

BARRAZA, CARLA E.; VALACCO P.; MORENO S.; SOLARI, CLARA A.; FERNANDEZ G.; PORTELA P.; GALELLO F.; ROSSI, SILVIA

Workshop; RNA molecular and cellular biology workshop; 2018

Examinamos el rol de la PKA en la respuesta a estrés térmico en S. cerevisiae. El estrés térmico moderado promueve la agregación de Tpk3, y de los factores eIF4G, Pab1 y eIF4E. En cambio, el estrés térmico severo lleva a la formación de PBs y SGs que contienen Tpk2, Tpk3 y el complejo de inicio de la traducción 48S. La deleción de TPK2 o TPK3 impacta en la respuesta traduccional de mRNAs frente a estrés, incluyendo CYC1, HSP42, HSP30 y ENO2. La deleción de TPK2 lleva a un arresto traduccional robusto, mayor agregación de SGs/PBs y una hipersensibilidad traduccional, mientras que delecionar TPK3 reprime la formación de SGs/PBs, el arresto traduccional y la respuesta para los mRNAs analizados. Analizamos los complejos proteicos formados bajo estrés térmico, mediante proteómica cuantitativa label-free. Identificamos proteínas enriquecidas exclusivamente en estrés térmico severo o moderado y proteínas comunes a ambos tipos de estrés. Análisis de Gene Ontology muestra en estrés térmico moderado un enriquecimiento en proteínas ribosomales y proteínas vesiculares COPI, mientras que en estrés térmico severo observamos factores de traducción, ribosomales y RNA binding. Las proteínas compartidas entre ambas temperaturas pertenecen a componentes de SGs/PBs y factores de traducción, las cuales no presentan mayor agregación proteica conforme aumenta la intensidad del estrés. Por lo tanto, el estrés térmico moderado y severo promueve agregación de mRNPs con diferente composición proteica.