Estudio de la actividad del disulfuro aromático NSC4492 sobre RNA y DNA virus.

DAMONTE, E.B.; GARCÍA, C. C.; SEPÚLVEDA, C.S.

CABA

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Las proteínas con motivos Zn-finger representan un blanco atractivo para la terapia antiviral ya que los dominios de unión a Zn suelen estar muy conservados dentro de cada especie viral. En particular, el disulfuro aromático NSC4492 (provisto por el National Cancer Institute, EEUU) ha mostrado efectiva actividad antiviral y virucida contra distintas cepas del virus Junín (JUNV) y otros arenavirus, por interacción con el motivo tipo RING finger de la proteína de matriz Z. A fin de establecer la relación entre la actividad inhibitoria de este compuesto y la presencia de motivos Zn-finger en las proteínas virales, se evaluó en este trabajo la susceptibilidad a NSC4492 de distintos RNA y DNA virus. Los virus ensayados en forma comparativa con JUNV, cepa IV4459, fueron: virus herpes simplex tipo 1 (HSV-1) cepa KOS, virus de la estomatitis vesicular (VSV) cepa Indiana, virus Polio tipo 3 (PV-3), virus dengue serotipo 2 (DENV-2) cepa NCG y virus sarampión (MV) cepa vacunal. Todos estos virus presentan diferentes tipos de motivos de unión a Zn, a excepción de VSV. La actividad antiviral se determinó mediante un ensayo de inhibición del rendimiento viral en células Vero y la actividad virucida se ensayó midiendo la infectividad remanente luego de incubar el virus con el compuesto 1.5 h a 37C.La actividad antiviral, indicada por los valores de concentración efectiva 50% (CE50), fue inferior a la actividad virucida para JUNV, HSV-1, VSV y MV, en tanto que con DENV-2 y PV-3 se observó la situación inversa. Los valores de índices de selectividad (CC50/CE50) variaron de 4,5 a 63,0. Respecto de la actividad virucida, HSV-1 y JUNV fueron los virus más susceptibles a NSC4492 con valores de concentración inhibitoria 50% (CI50) de 0,2 ± 0,006 y 0,08 ± 0,001 µM respectivamente. Para los restantes virus, las CI50 fueron significativamente más elevadas, con valores 6-8 veces mayores para VSV y MV (1,21 ± 0,08 y 1,60 ± 0,10 µM) y más de 150 veces superiores para PV-3 y DENV-2 (36,13 ± 1,48 y 94,21 ± 3,49). Estos parámetros, así como las curvas de respuesta a la dosis, muestran que la potencia de la actividad virucida de este tipo de agente parece ser muy variable en función del virus. Cabe destacar que la proteína ICP0 de HSV-1 así como la proteína Z de JUNV comparten la característica de presentar un motivo de tipo RING finger con secuencias C3HC4, en tanto que en las proteínas con unión a Zn de DENV-2, MV y PV3 las secuencias corresponden a otros grupos estructurales de motivos zinc-finger. Las diferencias observadas podrían estar relacionadas al tipo de arreglo de los aminoácidos que participan en la coordinación de las moléculas de Zn en los distintos motivos, así como por la accesibilidad a los agentes nucleofílicos de las cisteínas reactivas. Asimismo, la baja susceptibilidad de VSV, que carece de proteínas con motivo Zn-finger, plantea también la posibilidad de otro blanco secundario para esta clase de compuestos debido a su capacidad oxidante.