DITERPENOIDES NATURALES Y SEMI-SINTÉTICOS CON ACTIVIDAD ANTIVIRAL Y ANTI-INFLAMATORIA FRENTE A LA REPLICACIÓN DE ADENOVIRUS IN VITRO

PETRERA, E.; SCHMEDA-HIRSCHMANN, G.; PERTINO, M.W.; BIDART, J.; ALCHÉ, L.E.

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Sociedad Argentina de Virología

Los Adenovirus (AdV) humanos se asocian con infecciones esporádicas y con brotes en la comunidad. Susmanifestaciones clínicas comprenden infecciones tales como la fiebre faringo-conjuntival, neumonía, queratoconjuntivitis, gastroenteritis, etc.La respuesta inmune innata frente al patógenocontribuye al daño celular observado durante la infección.Hasta el momento no existe una terapia antiviral específica contra los AdV aprobada para su uso clínico.Considerando la urgencia por encontrar nuevas moléculasestudiamos la actividad antiviral e inmunomoduladorade compuestos de origen natural y de síntesis.Encontramos que la jatrofolona natural 2Aaislada de raíces deJatrophaisabeliiyla jatrofolonasemi-sintética 5B,así como el derivado 9C del ácidocarnósicoobtenido de hojas de RosmarinusofficinalisL,presentan actividad antiviral contra HSV-1 en células Vero y modulan la producción de citoquinas en macrófagos.Con el objetivo de evaluar la actividad antiviral de los compuestos 2A, 5B y 9Ccontra AdV, estudiamos primeramente su citotoxicidad en célulasde carcinoma de pulmón humano (A549) y comprobamos que la toxicidad es baja, obteniéndose valores de CC50 de 381,7M, >400 M y 246,9 M para los compuestos 2A, 5B y 9C respectivamente. Para estudiar la actividad antiviral in vitro, las células A549 se infectaron con el serotipo AdV5y se trataron durante 24 hs con los compuestos en concentraciones no citotóxicas, y el antiviral Rivabirina como control positivo.Mediante la técnica de inhibición del rendimiento viral utilizando una mi de 0,1 obtuvimos los siguientes valores de CE50: 50 M, 43,5M y 50,2 M para los compuestos 2A, 5B y 9C respectivamente. Con los correspondientes IS de 7,6; >9,2 y 4,9 respectivamente. Mediante el método de punto final determinando la acción citopática producida por el virus, establecimos valores de CE50 menores: 11,3M; 6,25 M y 18,8 M para 2A, 5B y 9C respectivamente. Además, se corroboró la inhibición de la propagación del virus por la acción de los compuestos realizandounainmunofluorescencia indirecta contra las proteínasE1A y hexón de AdV y con un ensayo de western blot.Paraevaluar la actividad inmunomoduladora de los diterpenos, se indujeron macrófagos murinos y humanos con los compuestos, Adv y el vector adenoviral y se cuantificaron las citoquinas: IL-6, IL-8, IL-10 y TNF- por el método de ELISA. Los diterpenos presentan actividad anti-infamatoria inhibiendo la producción de las citoquinas inducidas tanto por Adv como por el vector.Los resultadospresentados indican que la jatrofolona natural 2A, la jatrofolonasemi-sintética 5B y el derivado 9C del ácidocarnósicopresentan actividad antiviral contra AdV5 encélulas A549así como también actividad anti-inflamatoria en cultivos de macrófagos. Esta dualidad presente en los diterpenos puede ser una estrategia válida para controlar el progreso de la enfermedad inducida por el virus.