IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Participación del citoesqueleto celular en la entrada del serotipo 3 del virus dengue (DENV-3) a células Vero y A549.
Autor/es:
DAMONTE, E.B.; CASTILLA, V.; PICCINI, L.E.
Lugar:
CABA
Reunión:
Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017
Resumen:
El virus dengue (DENV) es un arbovirus de la familia Flaviviridae que es transmitido al hombre por mosquitos del género Aedes causando afecciones de distinta gravedad. Fue demostrado que DENV utiliza la vía endocítica para infectar a una gran variedad de células hospedadoras. Una vez que los viriones ingresan a la célula, es necesario que el desnudamiento ocurra en el compartimento subcelular propicio para que la infección sea productiva, en ese sentido fueron reportados tiempos de penetración tardía para DENV, con participación variable de Rab7, un marcador de endosomas tardíos, los cuales se disponen en la zona perinuclear. En los eventos descriptos se ha propuesto la intervención de los microfilamentos de actina en la escisión de las vesículas endocíticas a partir de la membrana plasmática celular y de los microtúbulos en el transporte endosomal hacia la zona perinuclear. El objetivo de este trabajo es el estudio de la participación del citoesqueleto en la entrada de DENV-3 a células Vero y A549, mediante la utilización de agentes polimerizantes y despolimerizantes de microfilamentos y microtúbulos. En primer lugar se determinaron las concentraciones no citotóxicas de los compuestos mediante el ensayo de viabilidad celular MTS. Luego se corroboró el efecto de los mismos sobre la integridad y morfología del citoesqueleto mediante marcadores fluorescentes. Los agentes despolimerizantes desestructuraron completamente los haces y la fluorescencia apareció difusa en el citosol celular, en cambio, los agentes estabilizantes de la polimerización provocaron la permanencia y profusión de los filamentos celulares. Posteriormente se evaluó la influencia de los compuestos sobre la internalización viral, utilizando la técnica de centros infecciosos, y sobre la multiplicación viral mediante ensayos de rendimiento viral. Los tratamientos con citocalasina D, latrunculina A ó faloidina, compuestos que alteran la dinámica de los microfilamentos de actina, no afectaron de manera significativa la internalización viral a células Vero y A549. En cuanto a los compuestos que perturban la dinámica de microtúbulos, nocodazol, colchicina y paclitaxel, redujeron la internalización y la multiplicación viral en las células A549. En las células Vero el efecto de estas drogas fue menor y estadísticamente no significativo. Del conjunto de los resultados obtenidos se puede concluir que el normal funcionamiento de la dinámica de los microfilamentos de actina no sería esencial en los eventos tempranos de la infección por DENV-3 en células Vero y A549. Por el contrario, el rol de los microtúbulos parece depender de la célula huésped, como otros eventos ligados a la entrada de DENV.