IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Homocisteina-tiolactona altera el efecto de proteínas del suero en cultivos de células endoteliales
Autor/es:
MALTANERI, ROMINA; VITTORI, DANIELA; CHAMORRO. M. EUGENIA; GENOUD, VALERIA; SCHIAPPACASSE, AGUSTINA; NESSE, ALCIRA
Reunión:
Jornada; Jornadas Interdisciplinarias del Departamento de Química Biológica; 2017
Institución organizadora:
Departamento de Química Biológica, FCEN-UBA
Resumen:
La homocisteína es considerada un factor de riesgo de enfermedad cardiovascular, ya que el aumento de sus niveles (hiperhomocisteinemia, HHcy) está asociado a disfunción endotelial involucrada en el desarrollo de trombosis y ateroesclerosis. Se ha propuesto a la homocisteína-tiolactona (HTL), especie altamente reactiva que induce N-homocisteinilación de proteínas por unión a residuos lisina, como responsable de la acción perjudicial de la HHcy. Se estudió si los estímulos proangiogénicos que generan, tanto el suero como albúmina y eritropoyetina, en el cultivo de células endoteliales son modificados cuando las proteínas son N-homocisteiniladas. El tratamiento consistió en incubación con HTL por 24 h a 37 °C. La modificación estructural de las proteínas fue analizada por electroforesis capilar, electroforesis en gel de poliacrilamida y cuantificación de grupos sulfhidrilos libres (reacción de Ellman). Se evaluó la migración celular por scratching, la invasión celular con transwellsy la formación de túbulos in vitro con matrigel en cultivos de células endoteliales EA.hy926. Se corroboró la reacción de N-homocisteinilación por el aumento de grupos sulfhidrilos y el cambio de la carga neta de las proteínas en electroforesis. En presencia del Suero-HTL la migración celular disminuyó significativamente en forma dependiente de la concentración de HTL, se impidió la invasión y la formación de túbulos con respecto a los ensayos en presencia de suero sin tratar. El tratamiento con HTL de la albúmina, la proteína más abundante en el suero, anuló su efecto promigratorio. Por la importancia farmacológica de la eritropoyetina recombinante, se estudió el efecto de HTL sobre la proteína en un ambiente proinflamatorio, observándose disminución significativa de su efecto promigratorio en presencia de TNF-α. Los resultados muestran que la N-homocisteinilación de las proteínas del suero altera su efecto proangiogénico. La modificación estructural de factores de crecimiento por HTL afectaría sus funciones fisiológicas y farmacológicas.