Actividad de acetilcolinesterasa en Cnesterodon decemmaculatus y Gambusia afinnis. Efectos de la exposición a clorpirifós (CPF) y su metabolito (CPF-oxon).

MENENDEZ HELMAN R. J.; BERNAL-REY, D.; DOS SANTOS AFONSO, M.

Santa Fe

Congreso; III Congreso Nacional de Ciencia y Tecnología Ambiental; 2017

SACyTA

El clorpirifós (O, O-dietil O-3,5,6-trichloropyridin-2-il fosforotioato, CPF) es un plaguicida organosforado del grupo fosfato ampliamente utilizado en Argentina. De las 38 mil toneladas de insecticidas que se utilizan en el país 9 mil toneladas corresponden a este insecticida1. Distintos autores han determinado su presencia en cuerpos de agua, donde podría afectar negativamente a especies no-blanco como los peces. Este insecticida inhibe la acetilcolinesterasa (AChE), enzima que tiene como función fisiológica degradar el neurotransmisor acetilcolina y es utilizada como biomarcador de neurotoxicidad. El objetivo de este trabajo es evaluar el efecto de CPF in vivo en Cnesterodon decemmaculatus y Gambusia affinis, y analizar la sensibilidad de la enzima de dichas especies mediante ensayos in vitro. Se realizaron bioensayos semi-estáticos siguiendo el protocolo de toxicidad propuesto por IRAM2. Los peces se aclimataron y en las mismas condiciones de luz y temperatura (23.0 ± 0.5 °C, fotoperíodo 12L:12O) fueron expuestos durante 96 h a concentraciones subletales: 1 y 5 µg CPF.L-1, o mantenidos en medio control. Al finalizar la exposición se determinó el largo y peso de los animales, se procedió a su disección y la preparación de homogenatos. La actividad de AChE se midió según el método de Ellman3 en los homogenatos de la sección anterior. Con el fin de analizar el origen de la inhibición de AChE in vivo, se estudió la sensibilidad de la enzima a la exposición a CPF in vitro. Para ello, se co-incubaron homogenatos de animales no expuestos (n=4 de cada especie) con soluciones de clorpirifós (CPF o su metabolito, CPF-oxon). Luego de la exposición aguda a CPF se observó una disminución de la actividad de AChE de 48% y 69% en C. decemmaculatus y de 27% y 36% en G. affinis para 1 y 5 μg de CPF × L-1, respectivamente. Los ensayos in vitro no mostraron sensibilidad diferencial de la enzima al CPF entre especies. Sin embargo, se determinaron diferencias estadísticamente significativas en las CI50 para la exposición a CPF-oxon (10,2 nM y 54,2 nM para C. decemmaculatus y G. affinis, respectivamente).La actividad AChE resulta un biomarcador sensible para la exposición a CPF en ambas especies, incluso a concentraciones bajas de CPF que son ambientalmente relevantes. Al mismo tiempo, C. decemmaculatus tiene una mayor susceptibilidad al CPF in vivo lo que podría deberse a una mayor sensibilidad de la enzima al CPF-oxon en esta especie.