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El glifosato (N-fosfonometilglicina; PMG) es un herbicida ampliamente utilizado en la región. La aplicación de sus formulaciones aumentó en Argentina de 70 mil toneladas a más de 180 mil toneladas entre 1999 y 2013; y en los últimos años se han reportado concentraciones de PMG de hasta 10,9 mg.L-1 en aguas superficiales. Por esta razón, resulta relevante caracterizar su toxicidad para especies no blanco, como los peces. En los organismos de fecundación externa, es de vital relevancia la calidad de los espermatozoides para alcanzar el oocito y completar el proceso de fecundación1 que transcurre en el ambiente acuático, receptor final de los contaminantes naturales y xenobióticos. Considerando lo antedicho, nos propusimos evaluar el impacto del glifosato sobre la motilidad espermática del pez cebra (Danio rerio) utilizando un sistema CASA (computer-assisted sperm analysis). Para ello, se llevaron adelante protocolos de exposición de gametas y determinación de motilidad2 en las instalaciones del Instituto de Biotecnología de la UNAM ? México. Se obtuvieron espermatozoides de pez cebra por disección de testículo (N=5) en un medio hiperosmótico. Posteriormente, se colocó una alícuota sobre portaobjetos y se activó por agregado de un medio control hiposmótico. A partir del instante de activación los parámetros de motilidad fueron analizados por un sistema CASA a los 15, 30, 60, 120 y 180 segundos post activación. Para cada muestra el procedimiento se repitió activando con cada una de las cinco concentraciones (0,5; 1; 5; 10 y 50 mg.L-1 equivalentes PMG) del formulado comercial Glifosato II (Atanor) preparadas en el mismo medio. Además, cada condición fue analizada para cada muestra por duplicado o triplicado.El grupo control mostró a tiempo 15 seg: VCL (velocidad curvilínea) = 96 ± 5 µm/seg; VSL (velocidad rectilínea) = 58 ± 6 µm/seg y %MOT (porcentaje de espermatozoides mótiles) = 71 ± 4. Los parámetros disminuyeron a lo largo del tiempo, determinándose a los 180 seg: VCL = 34 ± 2 µm/seg; VSL = 15 ± 1 µm/seg y %MOT = 50 ± 3. Por otro lado, los espermatozoides activados en medio conteniendo las concentraciones de 10 y 50 mg.L-1 de formulado a base de glifosato mostraron una tendencia de disminución de los parámetros de velocidad y %MOT, con el transcurso del tiempo. En este sentido, se determinaron diferencias estadísticamente significativa para la concentración más alta ensayada Estos resultados evidencian que la exposición a glifosato produce efectos sobre la motilidad espermática y reafirman la potencialidad del estudio de la motilidad espermática con el sistema CASA en estudios ecotoxicológicos.