IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
HOMOCISTEINA-TIOLACTONA ALTERA EL EFECTO DE LAS PROTEÍNAS DEL SUERO EN CULTIVOS DE CÉLULAS ENDOTELIALES
Autor/es:
CHAMORRO, ME; SHIAPPACASSE, A; GENOUD, V; NESSE, A; MALTANERI, R; VITTORI, D
Reunión:
Congreso; XIV CONGRESO URUGUAYO DE HEMATOLOGIA; 2016
Resumen:
Introducción: La hiperhomocisteinemia (HHcy) está asociada a la disfunción endotelial involucrada en el desarrollo de trombosis y ateroesclerosis. Se ha propuesto a la homocisteína-tiolactona (HTL), especie altamente reactiva que induce N-homocisteinilación de proteínas por unión a residuos lisina, como responsable de la acción perjudicial de HHcy.Objetivo: Estudiar si el estímulo del crecimiento y migración que genera el suero en el cultivo de células endoteliales es alterado cuando las proteínas del suero son tratadas con HTL. Métodos: El suero fetal bovino (S) fue incubado con HTL (2, 4 y 10 mM; 18 h, 37 °C) (S-HTL). La modificación en la estructura de las proteínas fue analizada por electroforesis capilar, electroforesis en gel de poliacrilamida y cuantificación de grupos sulfidrilos libres (reacción de Ellman). Se evaluó la migración celular por scratching, la invasión celular con transwells y la formación de túbulos in vitro con matrigel en cultivos de células endoteliales EA.hy926 y HMEC. Resultados: Se corroboró la reacción de N-homocisteinilación por modificación de la carga neta de las proteínas y aumento de grupos sulfidrilos. En presencia del S-HTL la migración celular disminuyó, en forma dependiente de la concentración de HTL y se impidió la invasión y formación de túbulos observado en presencia de suero sin tratar (S). Se estudió el efecto de HTL sobre albúmina (A) y fibronectina (FN), dos proteínas muy abundantes en S que incrementan la migración celular. Se demostró la alteración estructural de ambas proteínas por HTL lo que generó la disminución de su efecto promigratorio. Los resultados entre S y S-HTL, así como entre albúmina y fibronectina modificadas o no por HTL fueron significativamente diferentes. Conclusión: La N-homocisteinilación altera el efecto promigratorio del suero en células endoteliales, sugiriendo un posible mecanismo de acción antiangiogénica. La modificación de albúmina y fibronectina está involucrada en dicha acción.