Role of IL-17A on autophagy during human tuberculosis

PELLEGRINI, J; CASTELLO, FA; CASCO, N; GARCIA, V; TATEOSIAN, NANCY; MORELLI, MP; LEVI, A; COLOMBO M; AMIANO, N; ROLANDELLI, A; PALMERO, D

Rosario

Congreso; Reunión Latinoamericana de Tuberculosis y otras micobacteriosis y XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología; 2016

Sociadad latinoamericana de tuberculosis y otras micobaterias, Sociedad Argentina de Microbiologia

Una apropiada respuesta inmune contra Mycobacterium tuberculosis (Mtb) requiere respuestas de citoquinas Th1, pero se ha demostrado que el IFN- sólo no es suficiente para su erradicación. Al respecto, se ha reportado que la producción de IL-17 por linfocitos T CD4+ sería requerida para la eliminación de la infección primaria y el establecimiento de una respuesta de memoria efectiva. La autofagia es un proceso esencial que consiste en la degradación selectiva de componentes celulares y permite a las células eucariotas generar nutrientes en condiciones de hambreado, y ha sido descripto como un proceso regulador de la inmunidad innata, la inmunidad adaptativa y la inflamación. Las citoquinas Th1 poseen un rol positivo sobre la autofagia, mientras que las citoquinas Th2 clásicas presentan el efecto opuesto. Sin embargo, se desconoce el papel de otras citoquinas en la modulación de este proceso en pacientes con tuberculosis. Así, el objetivo del presente trabajo consistió en estudiar el rol de la IL-17A sobre la autofagia durante la TB humana. Mediante el estudio de las células CD14+LC3-II+, demostramos la capacidad de IL-17A de inducción de la autofagia durante la estimulación con un lisado de Mtb (Mtb-Ag) en células provenientes de individuos sanos y pacientes con TB que poseen alta respuesta inmunológica (TB AR), caracterizada por una aumentada linfoproliferacion, expresión del coestimulador SLAM y producción de IFN-inducida por estimulación con Mtb-Ag. Contrariamente, la IL-17A fue incapaz de inducir la autofagia en células CD14+ derivadas de los pacientes TB con baja respuesta inmunológica (TB BR). A fin de investigar la probable causa de la respuesta diferencial en la autofagia de los pacientes TB BR, estudiamos en primer lugar los niveles del receptor de IL-17A (sub unidad IL-17RA), sin encontrar diferencias significativas de expresión de en ambas poblaciones de pacientes con TB. Se ha reportado que la IL-17A una vez que señaliza a través de IL-17RA, induce la fosforilación de ERK. Así, mediante Western Blot observamos que la estimulación con Mtb-Ag incrementó la fosforilación de ERK en pacientes TB AR, y el agregado de IL-17A aumentó aún más esta fosforilación. En contraste, si bien la estimulación con Mtb-Ag incrementó levemente la fosforilación de ERK en pacientes TB BR, la adición de IL-17A no modificó la fosforilación de esta quinasa. Más aún, la inhibición de ERK en células de pacientes TB AR revirtió el efecto inductor de la IL-17A sobre la autofagia, ya que se observó una disminución significativa de CD14+LC3-II+. En conjunto, estos hallazgos sugieren que en pacientes TB BR, la IL-17A no induce fosforilación de ERK, impidiendo así el efecto de la citoquina sobre el proceso de autofagia durante la infección por Mtb, indicando que la participación de IL-17 en el proceso autofágico durante la TB humana está en directa asociación con la severidad de la enfermedad.