Alteración de la funcionalidad y dinámica mitocondrial en células del epitelio pigmentario de la retina expuestas a luz LED azul y al fluoróforo A2E de la lipofuscina. Implicancias en la Degeneración Macular Asociada con la Edad.

GARCIA-LIÑARES G; BALDESSARI A; ALAIMO A; GOROJOD RM; GRECCO HE; BUJJAMER JM; PORTE ALCON S; KOTLER ML

Buenos Aires

Congreso; XI congreso de AIVO (capitulo argentino de ARVO) y el III congreso conjunto entre AIVO y BRAVO (capitulo brasilero de ARVO); 2016

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO)

Objetivo: La degeneración macular asociada con la edad (DMAE) involucra el deterioro progresivo del epitelio pigmentario de la retina (EPR). Es una enfermedad multifactorial y entre los factores de riesgo se halla la exposición a la alta energía de la luz azul. La lipofuscina se acumula en las células del EPR y genera sensibilización frente al daño fotoquímico. Se estudió el efecto de la luz azul y el A2E (componente principal de la lipofuscina) sobre la funcionalidad y la integridad mitocondrial de células del EPR. Métodos: Células humanas ARPE-19 fueron expuestas a una fuente de luz LED azul (λ=445nm; 1,7mW/cm2) durante 1-30 minutos seguido de un período en oscuridad (24hs). Se estudiaron los siguientes parámetros: actividad metabólica mitocondrial (ensayo MTT), generación de ROS (sonda DCFDA) y superóxido (O2?-) (sonda MitoSOX) (espectrofluorometría y microscopía de fluorescencia). Laintegridad mitocondrial se analizó mediante inmunocitoquímica y microscopía de fluorescencia. A partir de las imágenes obtenidas y empleando el macro mitochondrial morphology del programa ImageJ, se cuantificaron los siguientes índices: elongación, interconectividad y masa mitocondrial. Resultados: La luz redujo significativamente la viabilidad de las células del EPR (1min: 89±6%, 5 min: 81±2%, 15min: 76±2% 30min: 52±5%), mientras que incrementó los niveles de ROS totales (1min: 34±6%, 5min:37±2%, 15min: 45±13%, 30min: 53±4%). Se detectó producción de O2?- (74%, p