IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Fluoromicobacteriófagos para la detección rápida de la Tuberculosis y resistencia a rifampicina.
Autor/es:
LATINI CECILIA; PABLO GONZALEZ MONTANER; ESTEFANIA URDANIZ; POGGI SUSANA; LILIANA RONDON; MARIO MATTEO; MARIANA PIURI
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; Congreso Latinoamericano y Argentino de Microbiologia 2016; 2016
Resumen:
La tuberculosis (TB) es una de las principales causas de mortalidad humana con aproximadamente 9 millones de nuevos casos por año y alrededor de 2 millones de muertes anuales. Aunque las infecciones con Mycobacterium tuberculosis (M. tb) suelen tratarse y resolverse con una terapia estándar la aparición de cepas resistentes complica el tratamiento. En particular aquellas cepas multi y extremadamente resistentes, convirtiéndose en un problema serio para el sistema de salud. El diagnóstico y determinación de susceptibilidad a antibióticos rápido es fundamental para evaluar el tratamiento a seguir y para evitar la diseminación de cepas resistentes. Aún hoy existe la necesidad de contar con nuevos métodos diagnósticos que combinen rapidez, sensibilidad, especificidad, seguridad para el operador y bajo costo para determinar el patrón de resistencia a las drogas más comunes empleadas en el tratamiento de la TB. Nuestro objetivo es comparar la performance del fluoromicobacteriófago ‐ mCherrybombɸ para la detección y determinación de resistencia a rifampicina directamente en muestras de esputo. Para evaluar el desempeño de mCherrybombɸ en muestras de esputo, se emplearon remanentes cedidos por el Laboratorio de Bacteriología de la TBC Dr. Abel Cetrángolo ? Hospital Muñiz. Los remanentes fueron recuperados en medio Middlebrook 7H9 +PANTA + OADC a 37°C durante diferentes tiempos para promover la recuperación de los bacilos presentes. Se plantearon dos diseños para este estudio, en el ̈Diseño 1 ̈ se diagnosticó la presencia/ausencia de la enfermedad en 312 muestras clínicas obteniendo un 85,25% de concordancia entre el método de mCherrybombɸ y el cultivo en Lowentein Jensen. En el ̈Diseño 2 ̈ se testearon 185 muestras clínicas con sospecha de la enfermedad tuberculosa diagnosticando la enfermedad además de la susceptibilidad/resistencia a Rifampicina en 48 y 96 horas, fármaco de importancia ya que es marcador de multiresistencia a drogas. Posterior al tiempo de recuperación de la muestra durante 48 y 96 horas se adiciono rifampicina 4μg/ml en simultáneo con mCherrybombɸ. Se obtuvo un 92,97% de concordancia entre los métodos para detectar la enfermedad, logrando además diagnosticar de manera rápida todas las muestras presentes con resistencia a rifampicina usando mCherrybombɸ. En los dos diseños la infección con mCherrybombɸ se realizó durante toda la noche a 37°C, finalmente las muestras fueron fijadas con paraformaldehído 2% final y se observó la presencia/ausencia de bacilos fluorescentes por microscopía. Se espera obtener un mayor número de muestras para realizar la determinación de la sensibilidad y especificidad del método propuesto. El mCherrybombɸ permite diagnosticar de manera rápida y económica la tuberculosis y su resistencia a rifampicina directamente en esputo, obteniendo resultados congruentes con los métodos usados de forma rutinaria en el ámbito hospitalario; facilitando el tratamiento y prevención de la propagación de cepas resistentes.