Actividad antiviral de compuestos diterpenoides naturales y semisintéticos sobre la replicación de adenovirus in vitro

PETRERA, E.; BIDART, J.; PERTINO, M.W.; SCHMEDA-HIRSCHMANN, G.; ALCHÉ, L.E.

Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología y II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

Sociedad Argentina de Virología

Los Adenovirus (AdV) humanos se asocian tanto con infecciones esporádicas como con brotes en la comunidad afectando tanto a niños de corta edad como a adultos. Las manifestaciones clínicas comprenden infecciones tales como la fiebre faringoconjuntival,neumonía, queratoconjuntivitisepidémica, cistitis, gastroenteritis, meningoencefalitis, hepatitis, miocarditis y la enfermedad fatal diseminada en pacientes inmunocomprometidos. Los serotipos AdV 1, 2, 5 y 6 son los causantes máscomunes de las infecciones del tracto superior y fiebre faringoconjuntival en niños pequeños. Hasta el momento no existe una terapia preventiva ni una terapia antiviral específica contra los AdV aprobada para su uso clínico.En nuestro laboratorio de Virología estudiamos la actividad antiviral de compuestos de origen natural y de síntesis. Recientemente hemos comenzado a trabajar con diterpenoides: jatrofolonas aisladas de raíces de Jatropha isabelii y sus derivados sintéticos, y con acido carnósico aislado de hojas de Rosmarinus officinalis L. del cual se han sintetizado distintos derivados. Hemos encontrado que la jatrofolona natural 2A, la jatrofolona semisintética 5B y el derivado 9C del acido carnósico presentan una potente actividad antiviral contra HSV-1 en células Vero.Considerando la urgencia por encontrar nuevas moléculas con acción antiviral, nos propusimos estudiar la actividad antiviral de los compuestos 2A, 5B y 9C contra AdV. Primeramente estudiamos la citotoxicidad de los compuestos en células de carcinoma de pulmón humano (A549) y comprobamos que la toxicidad es baja, obteniéndose valores de CC50 de 381,7μM, >400 μM y 246,9 μM para los compuestos 2A, 5B y 9C respectivamente. Para estudiar la actividad antiviral in vitro, las células A549 se infectaron con el serotipo AdV5 y se trataron durante 24 hs con los compuestos en concentraciones no citotóxicas. En todos los ensayos utilizamos el antiviral Rivabirina como control positivo. Mediante la técnica de inhibición del rendimiento viral utilizando una mi de 0,1 obtuvimos los siguientes valores de CE50: 50 μM, 43,5 μM y 50,2 μM para los compuestos 2A, 5B y 9C respectivamente. Con los correspondientes IS de 7,6; >9,2 y 4,9 respectivamente. Mediante el método de punto finaldeterminando la acción citopática producida por el virus y utilizando una mi de 0,25, establecimos valores de CE50 menores: 11,3 μM; 6,25 μM y 18,8 μM para 2A, 5B y 9C respectivamente. Además, se corroboró la inhibición de la propagación del virus por la acción de los compuestos mediante larealización de una inmunofluorescencia indirecta contra las proteínas E1A y hexón de AdV. Ensayos de agregado y remoción del compuesto 5B a distintos tiempos revelan que la acción antiviral estaría ejerciéndose en una etapa tardía, luego de las 7 hs pi.Estos resultados indican que la jatrofolona natural 2A, la jatrofolona semisintética 5B y el derivado 9C del acido carnósico presentan actividad antiviral contra AdV5 en células A549.