LA ASOCIACIÓN ENTRE HEMO OXIGENASA 1 Y PROTEÍNAS REGULADORAS DEL CITOESQUELETO INDUCE UN CAMBIO MORFOLÓGICO EN CÉLULAS DE CÁNCER DE PRÓSTATA

ALEJANDRA PAEZ; CARLA PALLAVACINI; JIMENA GIUDICE; EMILIANO ORTIZ; FEDERICO SCHUSTER; NICOLAS ANSELMINO; LUCIANA BRUNO; VALERIA LEVI; ELBA VAZQUEZ; GERALDINE GUERON

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

La motilidad celular involucra variaciones en el citoesqueleto. Los rearreglos de actina en la periferia de una célula permiten su motilidad y la pérdida del contacto célula-célula aumenta su capacidad migratoria. Hemo oxigenasa 1 (HO-1), involucrada en la degradación del hemo, tiene un rol crítico en cáncer de próstata (PCa) disminuyendo la migración e invasión y aumentando la adhesión. En este trabajo se analizó la dinámica del citoesqueleto en la periferia celular. Para cuantificar los contactos celulares, dos líneas celulares de PCa fueron tratadas con hemina y teñidas con faloidina-rodamina. Se analizaron regiones en las cuales se observaba contacto de filopodios entre células vecinas a distancias celulares constantes. Se determinó un perfil de intensidades en estas regiones, con un algoritmo diseñado para contar contactos. Los microtúbulos se analizaron en células PC3 por microscopía confocal y microscopía de reconstrucción óptica estocástica (STORM). Aunque no varió la longitud de persistencia de los microtúbulos de células que sobre-expresan HO-1, se observaron variaciones significativas en el número de filopodios y contactos celulares. Para identificar proteínas asociadas a HO-1 e involucradas en la regulación del citoesqueleto, se inmunoprecipitaron lisados de células PC3 que expresaban FLAGHO-1. El producto se sometió a LC/ESI-MSMS y el análisis por ontología génica mostró un enriquecimiento de proteínas asociadas a la organización del citoesqueleto. Entre las proteínas identificadas se encontraron, Gelsolina y Tropomodulina, involucradas en la regulación de las fibras de estrés. El análisis de genes modulados por HO-1 (RT-qPCR Oligo GEArray) reveló que HO-1 regula genes como Actina alfa-3 y MMP14, relacionados con la motilidad celular. Estos resultados muestran que HO-1 induce la remodelación de los filamentos de actina, alterando la morfología celular en PCa.