Actividad antiviral de los Carragenanos frente a la infección de Dengue Serotipo 3 en células de mamífero

LUANA É PICCINI; VIVIANA CASTILLA; ELSA B. DAMONTE

CABA

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología - II Congreso LAtinoamericano de Virología; 2015

Asociación Argentina de Microbiología

ACTIVIDAD ANTIVIRAL DE LOS CARRAGENANOS FRENTE A LA INFECCIÓN DE CÉLULAS DE MAMÍFERO CON DENGUE-3.Piccini, LE; Castilla, V; Damonte, EBLaboratorio de Virología, Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, UBA - IQUIBICEN, CONICETEl virus del dengue (DENV) es un arbovirus perteneciente a la familia Flaviviridae, transmitido al hombre por los mosquitos Aedes aegypti y Aedes albopictus. Los cuatro serotipos de DENV (DENV1-4) son causantes de una enfermedad febril aguda, benigna y auto-limitada (fiebre del dengue), o de formas clínicas más severas y potencialmente letales (fiebre hemorrágica de dengue y síndrome de shock por dengue). Actualmente urge la necesidad del desarrollo de agentes antivirales para la quimioterapia, ya que no se dispone de vacunas ni de drogas específicas. La entrada viral se presenta como una alternativa atractiva para la intervención terapéutica, ya que bloquearía el comienzo de la infección. Estudios previos han demostrado que los polisacáridos sulfatados interfieren en la interacción receptor-glicoproteína E viral. Dentro de este grupo, los carragenanos aislados de algas marinas presentaron una potente actividad antiviral frente a los serotipos DENV-2 y DENV-3 en células Vero y HepG2 mientras que no inhibieron la multiplicación de DENV-1. El objetivo del presente trabajo fue extender el estudio del mecanismo de acción de los carragenanos lambda y iota sobre la infección de DENV-3 en células Vero y A549. Ambos carragenanos presentaron actividad antiviral contra DENV-3 en los dos tipos celulares, con valores de concentración efectiva 50% de 0,5-0,7 µg/ml, determinados mediante ensayos de inhibición del rendimiento viral. También se observó una inhibición del orden del 90% en el número de células que expresan la glicoproteína viral por inmunofluorescencia indirecta. La ausencia de citotoxicidad sobre ambas células hasta la máxima concentración probada de 1000 µg/ml, medida por el método colorimétrico del MTT, confirió a estos polisacáridos un alto índice de selectividad. La actividad antiviral de los carragenanos fue dependiente del tiempo de adición del compuesto no registrándose significativa reducción en el número de placas cuando se agregaron después de 1 h post-infección. Por lo tanto, se decidió evaluar su efecto sobre las etapas iniciales de adsorción e internalización viral. Se observó inhibición de la multiplicación viral en células Vero y A549 cuando los compuestos sólo estuvieron presentes durante el período de adsorción viral a 4°C o durante la posterior internalización a 37°C. En conclusión, la acción antiviral de ambos carragenanos tanto en células Vero como en células A549 afectó las etapas tempranas del ciclo de multiplicación viral, probablemente por interferencia en la interacción de la glicoproteína viral con los residuos de heparan sulfato de proteoglicanos de la superficie celular, molécula propuesta como receptor inicial en la infección con DENV.