IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN FUNDAMENTALES EN CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES MODULAN LA ACTIVIDAD DEL PROMOTOR DEL GEN DE LA METIL-TRANSFERASA DE ARGININAS PRMT8
Autor/es:
VÁZQUEZ ECHEGARAY, CAMILA; SOLARI, CLAUDIA; COSENTINO, SOLEDAD; PETRONE, MARÍA VICTORIA; FRANCIA, MARCOS; WAISMAN, ARIEL; CANIZO, JESICA; VILLODRE, EMILLY; LENZ, GUIDO; MIRIUKA, SANTIAGO; BARAÑAO, LINO; GUBERMAN, ALEJANDRA
Reunión:
Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, LXII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2015
Resumen:
Las modificaciones post-traduccionales de los residuos de histonasllevadas a cabo por remodeladores de la cromatina son partefundamental de la regulación epigenética celular. Un tipo demodificación es la adición de grupos metilo a los residuos arginina,mediada por la familia de enzimas metiltransferasas de argininas(PRMT), cuyo principal miembro es PRMT1, fundamental en eldesarrollo. Su parálogo PRMT8 se encuentra poco estudiado y se hareportado su expresión únicamente en neuronas adultas yneurogénesis. Sin embargo, previamente encontramos que este gense expresa en células madre pluripotentes (CMP) y que se reprimedurante la diferenciación. Bajo la hipótesis que este gen podría serregulado por los factores de transcripción (FT) fundamentales enCMP, Oct4, Sox2 y Nanog, nos propusimos estudiar su regulación.Para ello construimos un vector reportero mediante el clonado de unaregión del promotor de Prmt8, abarcando un sitio putativo de uniónpara Nanog y uno de complejos formados por FT presentes en CMP,río arriba de la secuencia codificante para la proteína luciferasa.Utilizamos el plásmido obtenido, pPrmt8-Luc, en ensayos de transactivaciónen la línea celular NIH 3T3, en la cual no detectamosexpresión de los factores Oct4, Sox2 y Nanog. Mediante cotransfeccióncon distintas cantidades de vectores de expresión paradichos FT, encontramos que la actividad luciferasa fue inducidafuertemente de manera dosis-dependiente por Nanog, y en menormedida por Oct4 y Sox2. Esto indica que estos FT modulanpositivamente dicha región promotora. Para profundizar este análisisestamos estudiando la regulación de este gen en su contextoendógeno, mediante RT-qPCR, tanto silenciando los mencionados FTmediante la estrategia de short hairpin ARN en CMP, comosobreexpresando los mismos en NIH 3T3. Esperamos que estosresultados contribuyan a la comprensión de los mecanismosmoleculares relevantes para el mantenimiento de las propiedadesfundamentales de CMP.