IQUIBICEN   23947
INSTITUTO DE QUIMICA BIOLOGICA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL DE LA ACETIL-TRANSFERASA DE HISTONAS MYST4 POR LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN ESENCIALES EN CÉLULAS MADRE PLURIPOTENTES
Autor/es:
COSENTINO S; SOLARI C; WAISMAN A; VAZQUEZ ECHEGARAY C; PETRONE MV; FRANCIA M; BARAÑAO L; GUBERMAN A
Reunión:
Congreso; reunion anual de la SAIC 2015; 2015
Resumen:
La pluripotencia y autorrenovación, propiedades fundamentales de lascélulas madre (CM) embrionarias (CME), son mantenidas por factoresde transcripción (FT) específicos, siendo los más importantes Oct4,Sox2 y Nanog. Con el objetivo de estudiar remodeladores de lacromatina relevantes en CME, analizamos estudios de ChIP a granescala, seleccionando genes que poseen sitios de unión para dichosFT, y que por lo tanto su expresión podría estar regulada por éstos.En este trabajo estudiamos a Myst4, una acetiltransferasa de histonasque posee un elemento regulatorio altamente ocupado por losmismos. Analizamos la expresión de Myst4 por RT-qPCR, en CMEmurinas indiferenciadas y en distintos estadios de diferenciación.Encontramos que en los tres protocolos de diferenciación utilizados,Myst4 se reprimió notoriamente. A continuación, para estudiar laregulación en un sistema más definido, disminuimos la expresión deOct4 y Nanog en CME mediante transfección con shRNAs específicos.La expresión de Myst4 se redujo en las condiciones en que cualquierade los dos FT fue silenciado parcialmente. Estos resultados indicanque Oct4 y/o Nanog podrían estar involucrados en la regulacióntranscripcional de este gen. Dado que planeamos investigar laparticipación de Myst4 en procesos que deben ser analizados a largoplazo, utilizamos una estrategia de shRNA inducible mediada por elvector Tet-pLKo. Obtuvimos 4 construcciones con distintassecuencias de shRNA, y sólo una de ellas produjo una altadisminución en el ARNm de Myst4 con respecto al control.Actualmente estamos generando líneas estables de CME con estaconstrucción y una línea control con el vector vacío. Estudiaremos elefecto del silenciamiento de Myst4 sobre el mantenimiento del estadoindiferenciado y sobre la diferenciación. Consideramos que lacomprensión de los mecanismos involucrados en la regulación de laestructura de la cromatina en CM pluripotentes es fundamental parasu futura aplicación.