Inactivación fotodinámica de Staphylococcus aureus mediada por el nuevo derivado monobromado de Rojo Neutro.

MARÍA NOEL URRUTIA, FABIANA ALOVERO, CRISTINA ORTIZ.

Congreso; Tercera Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos. Grupo Argentino de Fotobiología (GRAFOB); 2016

Inactivación fotodinámica de Staphylococcus aureus mediada por el nuevo derivado monobromado de rojo neutroPhotodynamic inactivation of Staphylococcus aureus mediated by a new monobrominated Neutral Red derivativeMaría Noel Urrutia,1,2 Fabiana Alovero2, Cristina Ortiz21 INIFTA- CONICET. Departamento de Química, Facultad de Ciencias Exactas, UNLP.2 UNITEFA- CONICET. Departamento de Farmacia, Facultad de Ciencias Químicas, UNC.IntroducciónStaphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) se encuentra entre las bacterias multirresistentes más frecuentes en ámbitos hospitalarios y en la comunidad. La Inactivación Fotodinámica ha sido propuesta como un tratamiento alternativo para infecciones localizadas debido a su elevada eficiencia y baja probabilidad de inducir resistencia, representando un enfoque prometedor para el tratamiento de infecciones multirresistentes. Neutral Red monobromado (NRBr), perteneciente a la Familia de las Azinas y derivado de Neutral Red (NR), fue sintetizado en nuestro laboratorio. NRBr presentó propiedades fisicoquímicas apropiadas para su aplicación como potencial fotosensibilizador (FS). Objetivo El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto fotoantimicrobiano de NRBr frente a Staphylococcus aureus ensayando simultáneamente NR, siendo limitada la información disponible actualmente sobre su acción frente a bacterias. Materiales y MétodosSe evaluó el efecto de la concentración de FS (5-200 µM) y tiempos de irradiación con luz visible (15, 30 y 60 minutos) en la fotoinactivación de 2 cepas de S. aureus, 1 sensible (S. aureus ATCC 25923) y otra multirresistente a antimicrobianos convencionales (MRSA 61). Diluciones seriadas en buffer fosfato salino se sembraron en agar Müeller-Hinton para recuento de viables luego de 18-24 h a 37°C. Se promediaron resultados de 3 experimentos independientes y la diferencia entre medias se analizó mediante la prueba de t de Student de dos colas (P < 0.05).ResultadosNo se observó toxicidad en oscuridad en cultivos expuestos a ambos FS hasta 200 µM. NRBr produjo mayor fotoinactivación que NR, exhibiendo efecto dependiente de la concentración y del tiempo de irradiación. El empleo de 50 µM de NRBr disminuyó > 4 log10 el recuento de S. aureus ATCC 25923 con 30 minutos de irradiación. NRBr erradicó el inóculo en todo el intervalo de concentraciones evaluado luego de 60 minutos, en tanto que NR no alcanzó completa fotoinactivación en ninguna de las condiciones ensayadas. El mayor efecto exhibido por este FS, fue la reducción de ~3,2 log10, empleando 50 µM con 60 minutos de irradiación, en tanto que no se observaron cambios significativos en la actividad con el incremento de la concentración. La fotoinactivación mediada por NRBr fue menor frente a MRSA 61, evidenciando una reducción del inóculo inicial entre 1-1,3 log10 menos que lo observado frente a S. aureus ATCC 25923. Por su parte, NR exhibió escasa actividad frente a esta cepa cepa. ConclusionesSe demostró un incremento significativo en la acción fotoantimicrobiana de NRBr comparada con NR, lo cual podría atribuirse a las mejores propiedades fisicoquímicas evidenciadas por el FS bromado. Por lo cual, el nuevo derivado de Azina representa un prometedor FS para su aplicación en inactivación fotodinámica de S. aureus. Por otra parte, será necesario ampliar el número de aislamientos sensibles y resistentes a antimicrobianos para arribar a conclusiones definitivas respecto de las diferencias observadas entre las cepas de este estudio.