Evaluación de la permeabilidad de morfina en líneas celulares Caco-2 a partir de una nueva composición farmacéutica conteniendo ácidos grasos omega-3

ROMAÑUK CAROLINA BEATRIZ; MONTEIRO PARAISO RAFAEL LEAL; GONÇALVES JOSÉ EDUARDO ; MANZO RUBEN HILARIO; LAINO CARLOS HORACIO; STORPIRTIS SILVIA; OLIVERA MARÍA EUGENIA

Córdoba

Congreso; VI Congreso Iberoamericano de Ciencias Farmacéuticas, COIFFA 2015; 2015

COIFFA y SAFE

INTRODUCCIÓN Y OBJETIVO. Se logró compatibilizar en combinación a dosis fija, MOR con ácidos grasos omega 3 (O3), mediante una nueva composición farmacéutica (MOR:O3, P-20120100854). Estudios en animales mostraron que dicha composición produce un efecto analgésico sinérgico en el cual está involucrado el sistema opioide. Dado que los O3 pueden incrementar la permeabilidad a través de membranas biológicas, se consideró de interés estudiar si modificaciones en la absorción de MOR en presencia O3 que pudieran contribuir al incremento del efecto analgésico observado. Con este objetivo se llevó a cabo un estudio de permeabilidad empleando monocapas de líneas celulares Caco-2. METODOLOGÍA. Células (ATCC # HTB-37) fueron cultivadas (37 °C, 5 % de CO2 y 90 % de HR) en medio DMEM con alta concentración de D-glucosa y bicarbonato de sodio, suplementado con suero fetal bovino, aminoácidos no esenciales, glutamina, penicilina y estreptomicina.Se realizó un estudio de citotoxicidad (guía ISO 10993-5), para MOR y O3 frente a las células Caco-2 a los fines de determinar las concentraciones de MOR a ser utilizadas en los ensayos de permeabilidad.Para los experimentos de permeabilidad, las células en suspensión fueron transferidas a placas Transwell de 12 pozos con soporte de policarbonato e incubadas durante 7 y 21 días. La densidad celular fue de 5x104 células/cm2. Las muestras se prepararon en concentración 50 µM MOR en buffer Hanks y se evaluaron por triplicado en sentido apical-basolateral y basolateral-apical. El contenido de MOR en las muestras fue cuantificado por HPLC. Se calculó el coeficiente de permeabilidad aparente (Papp), utilizando como control interno patrones de alta (succinato de metoprolol) y baja (hidroclorotiazida) permeabilidad.RESULTADOS. La concentración de MOR que permitió una viabilidad superior al 70 % fue de 50 μM, por lo que ese valor fue seleccionado para llevar a cabo los estudios de permeabilidad. Los valores de Papp para los patrones de alta y baja permeabilidad se corresponden con los publicados, confirmando la integridad y viabilidad de las monocapas de Caco-2. La Papp de MOR desde MOR:O3 o MOR-HCl no muestran diferencias significativas (p>0,05) tanto a los 7 como a los 21 días, indicando que los O3 no afectan significativamente el pasaje de MOR a través de las membranas de las célulasCaco-2.CONCLUSIONES. En las condiciones estudiadas, la presencia de O3 en la nueva composición MOR:O3 no modifica la permeabilidad de MOR en membranas de las célulasCaco-2, indicando que este factor no contribuiría al incremento de analgesia observado.