OBTENCIÓN Y EVALUACIÓN DE SISTEMAS BINARIOS SÓLIDOS DE CLARITROMICINA

GOMEZ CS; AIASSA V; ZOPPI A; BARTOLILLA A; LONGHI MR

Guatemala

Simposio; Simposio Iberoamericano en línea ? COIFFA 2022 Salud global y sostenibilidad.; 2022

CONFERENCIA IBEROAMERICANADE FACULTADES DE FARMACIA

Claritromicina (CLM) es un antimicrobiano macrólido semisintético con un amplio espectro de actividad antimicrobiana, que incluye a numerosos microorganismos: Gram positivos (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes y S. pneumoniae), gram negativos aerobios (Haemophilus influenzae), bacterias anaeróbicas y otros microorganismos atípicos como Chlamydia, Mycoplasma y Legionella spp. 1. Presenta muy baja solubilidad acuosa, siendo la misma dependiente del pH2. Se han descrito ocho formas cristalinas de CLM: la forma 0 (disolvente etanol), la forma I, la forma II, la forma III (disolvente acetonitrilo), la forma IV (hidrato), la forma V, la sal clorhidrato y el disolvente metanol. De estas formas cristalinas, la forma II, la más estable, se aplica para uso clínico en formulaciones. Bajo una solución ácida por debajo de pH 1,5, los cristales de la forma II del CLM se transforman rápidamente en un gel transparente. Se cree que la formulación de CLM de tiempo de residencia gástrico prolongado es eficaz para la erradicación de Helicobacter pylori, ya que la bacteria reside principalmente en la mucosa gástrica. Con el fin mejorar la actividad antimicrobiana y antibiofilm de este fármaco, se procedió a la formación y evaluación de un nuevo sistema binario sólido de CLM con N-acetilcisteína (NAC). Se seleccionó NAC porque es un fármaco conocido por disminuir la formación de biofilms de una diversidad de microorganismos y disrumpir la estructura de la sustancia polimérica extracelular (SPE), interrumpiendo la formación de la biofilms maduros3. Además, la interacción de CLM y NAC mejora la solubilidad de CLM, lo que puede optimizar por ende su biodisponibilidad4. METODOLOGÍA: El sistema binario de CLM:NAC en relación molar 1:2 se obtuvo mediante el agregado de una solución de NAC a la CLM sólida en mortero de ágata y posterior mortereado hasta obtener un gel. El gel se secó a temperatura ambiente para obtener el sistema sólido. El sistema CLM:NAC 1:2 también se preparó mediante mezcla física (MF) en mortero de ágata. Los sólidos CLM:NAC se caracterizaron a través de espectroscopia infrarroja (FTIR) y microscopía de platina calentable (HSM). El efecto antimicrobiano de CLM y el sistema binario frente a Staphylococcus aureus resistente a meticilina clínico 771 (SAMR 771) se determinó por el método de difusión desde discos en agar de acuerdo con los estándares del Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI). La concentración inhibitoria mínima (CIM) de CLM se determinó, por el método de dilución según los lineamientos de CLSI. La actividad de CLM y su sistema binario frente a biofilms de SAMR 771 se evaluó mediante microscopía electrónica de barrido (SEM), utilizando concentraciones de CLM equivalentes a 100 X CIM [50 µg/ml]. RESULTADOS: La interacción entre CLM y NAC en estado sólido, se evaluó por espectroscopía FTIR. Se obtuvieron los espectros correspondientes a los compuestos puros, a la MF y al sistema binario CLM:NAC (1:2). El espectro FTIR de CLM puro se caracterizó por sus picos de absorción en 3468 cm-1 (estiramiento grupo OH), en 2978cm-1 (CH alifático), en 1732cm-1 (estiramiento C=O), en 1457cm-1 (CH3 bending), en 1096cm-1 (estiramiento C-N) y a 1049cm-1 (estiramiento C-O). El espectro IR de la NAC, se observaron bandas representativas a 1716 cm-1 (carboxilo), 2546 cm-1 (sulfhidrilo) y 3375 cm-1 (amina secundaria). En la MF, solo se observó el espectro correspondiente a CLM sin la superposición de los picos de NAC, esto podría deberse al gran peso molecular de CLM respecto a NAC. En el sistema binario CLM:NAC vemos un ensanchamiento e incremento en intensidad del pico de 3468cm-1 (estiramiento OH) de CLM y una reducción en intensidad correspondiente al pico de 1732cm-1 (estiramiento C=O) de NAC. A su vez, vemos la aparición de un pico de absorción a 1600cm-1 que podría atribuirse a la formación de una sal de amina. Estos hallazgos sugieren que varias interacciones entre los componentes ocurrieron durante la formación del sistema. En el HSM, observamos que la fusión de CLM comienza a 240 °C y para NAC a 113°C. En el caso del sistema preparado por MF se observa primero la fusión de NAC a 113°C y luego funde CLA a 150°C (Fig. B3). En el sistema binario CLM:NAC (1:2), se observó que a 120°C el sólido comienza a fundir. Con respecto a la actividad antibacteriana, los resultados mostraron que el complejo binario CLM:NAC presentó un halo de inhibición significativamente mayor (30 + 0 mm) que la CLM pura (19.3 + 0.6 mm), lo que podría deberse a que la combinación de CLM con NAC conduce a un efecto sinérgico de ambos fármacos al utilizados de manera conjunta. En cuanto al biofilm, por SEM se observó que la cepa sin tratamiento es capaz de adherirse y de formar grandes masas de biofilm rodeadas de SPE. CLM (50µg/ml) y NAC (20µg/ml), causan una disminución en la adhesión y formación de biofilm, mientras que el sistema CLM:NAC (1:2) a la misma concentración CLM (50µg/ml) no permitió ni siquiera la adherencia de S. aureus. CONCLUSIONES. Se obtuvo un sistema binario CLM:NAC 1:2 en estado sólido por un método simple que demostró tener una mayor actividad antibacteriana y antibiofilm que CLM pura. Este sistema resulta prometedor dado a su interesante potencial antimicrobiano que puede traducirse a un mejor efecto terapéutico de CLM.