IIBYT   23944
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS Y TECNOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efectos del péptido de origen vegetal jaburetox sobre componentes del sistema inmune de rhodnius prolixus (hemiptera:reduviidae)
Autor/es:
SIGNORELLI NUÑEZ; PEDRO D. CLOP; LEONARDO LUIS FRUTTERO; RAMOS FO; LILIÁN ETELVINA CANAVOSO
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Congreso; XXII Jornadas Científicas Sociedad de Biología de Córdoba; 2019
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Córdoba
Resumen:
Los insectos carecen de inmunidad adaptativa y despliegan para su defensa una eficiente respuesta inmune innata. La misma es llevada a cabo por componentes celulares, hemocitos, responsables de la fagocitosis, la encapsulación y la nodulación de patógenos, y por mediadores humorales. La lipoforina, principal lipoproteína en la circulación de los insectos, es sintetizada por el cuerpo graso y distintos estudios han demostrado que tiene capacidad para unir e inactivar diversas toxinas, así como atrapar y neutralizar agentes exógenos. Jaburetox (Jbtx) es un péptido entomotóxico recombinante obtenido a partir de una de las principales isoformas de la ureasa de la leguminosa Canavalia ensiformis. El triatomino Rhodnius prolixus es uno de los vectores de mayor importancia epidemiológica para la enfermedad de Chagas. Además de ser un modelo de laboratorio para estudios básicos de fisiología de insectos, ha sido empleado para dilucidar los mecanismos de acción de ureasas vegetales y péptidos derivados. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto entomotóxico de Jbtx sobre las poblaciones de hemocitos y sobre la expresión de lipoforina en cuerpo graso de ninfas V del vector R. prolixus. Para los estudios, los insectos fueroninyectados en el hemocele con PBS (grupo control) o con Jbtx (0,025 µg/mg de peso del insecto, grupo problema). A distintos tiempos post-inyección (3, 6 y 20 h) se procedió a la colección de la hemolinfa y a la disección del cuerpo graso según corresponda. Para los ensayos de citometría de flujo, las muestras de hemolinfa fueron tratadas con ioduro de propidio (PI) como fluorocromo marcador de la permeabilidad de la membrana plasmática. En estos ensayos se evaluaron modificaciones sobre el tamaño (FSC), la complejidad (SSC) y la captación de PI en los hemocitos analizando los resultados en escala logarítmica. Por otro lado, los cuerpos grasos fueron homogenizados y procesados para ensayos de ELISA y qPCR a los fines de evaluar los niveles de lipoforina y la expresión del transcripto. También se incluyeron ensayos preliminares de ultracentrifugación analítica empleando lipoforina y Jbtx con el objetivo de estudiar una posible interacción entre ambas moléculas. Los resultados de citometría de flujo mostraron que los hemocitos del grupo de insectos tratados con Jbtx son más permeables al PI, sugiriendo un potencial efecto deletéreo de la toxina sobre estas células. En las condiciones analizadas, el tratamiento con Jbtx no indujo modificaciones significativas en la expresión de lipoforina en cuerpo graso. En conjunto, estos hallazgos constituyen un punto de partida para futuros estudios dirigidos a obtener un mejor entendimiento del mecanismo de acción de esta toxina, necesarios para su aplicación como bioinsecticida en el control de especies plaga.