IIBYT   23944
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS Y TECNOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Respuestas de los astrocitos al status epilepticus en un modelo in vitro
Autor/es:
CRAGNOLINI, AB; SILVA, G; FRANCHI, NA
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Jornada; XII Jornadas Científicas Sociedad de Biología de Córdoba; 2019
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Córdoba
Resumen:
Introducción. Los astrocitos cumplen un rol fundamental en situaciones de daño en el sistema nervioso central, y sufren cambios morfológicos y funcionales que afectan al funcionamiento neuronal. Un daño neuronal inducido por status epilepticus (SE) in vitro produce un desbalance en la expresión de neurotrofinas y sus receptores, que puede llevar a la neurodegeneración. Sin embargo, en varios modelos de daño neuronal se ha demostrado que los astrocitos pueden ejercer un rol neuroprotector atenuando la muerte celular. Resultados previos de nuestro laboratorio demuestran que la presencia de astrocitos en un cultivo de neuronas sometido a SE previene la neurodegeneración 12h post-SE. Si bien se conocen con detalle los mecanismos que llevan a la muerte neuronal, poco se sabe acerca de los cambios que ocurren en los astrocitos durante un proceso neurodegenerativo y sobre la comunicación con las neuronas que induce la neuroprotección. Una posibilidad es que la secreción de vesículas extracelulares (VE) contribuya a propagar señales moleculares que intervienen en la reparación/neuroprotección. Objetivos. Caracterizar la respuesta de los astrocitos al SE y evaluar la secreción de VE como posibles mediadoras de un efecto neuroprotector. Metodología. Se utilizó un modelo de SE in vitro que consiste en la incubación de las neuronas o los astrocitos en un buffer libre de magnesio, esto activa los receptores NMDA provocando descargas de alta frecuencia en neuronas. Luego de provocado el SE se obtuvo el medio condicionado de astrocitos, se caracterizaron las VE liberadas por medio de microscopía electrónica y Western blot, y además, se evaluaron parámetros de viabilidad y reactividad astrocítica. Los resultados preliminares obtenidos demuestran que el SE induce reactividad glial, evaluada por medio de la cuantificación de la expresión de la proteína GFAP pero no afecta la viabilidad de los astrocitos. Por otra parte demostramos que los astrocitos son capaces de liberar vesículas extracelulares las cuales pueden servir como mensajero para la comunicación con las neuronas. Además, describimos, por primera vez que estas vesículas contienen la proteína astrocítica, GFAP. Discusión. Estos resultados sugieren que el SE no altera la viabilidad de los astrocitos, lo cual es un elemento fundamental para poder ejercer un rol neuroprotector. Por otra parte, identificamos en VE de astrocitos la presencia de un marcador clave, la proteína GFAP, que nos permitirá a futuro caracterizar las vesículas provenientes de estas células gliales en cultivos mixtos o, incluso en modelos de neurodegeneración in vivo.