Cell Fusing Agent Virus detectados en mosquitos adultos Aedes aegypti colectados en la Ciudad de Resistencia, Chaco.

STECHINA OS; CONTIGIANI MS; DIAZ LA; STEIN M; ORIA GI

Corrientes

Jornada; XXIV Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2018; 2018

Todos los virus del género Flavivirus (Familia Flaviviridae) son envueltos y tienen un genoma de ARN de polaridad positiva, con un único marcoabierto de lectura a partir del cual se traduce una poliproteína viral. En base a estudios filogenéticos, ecológicos, epidemiológicos se clasifican en cuatrogrupos conocidos como: i) flavivirus transmitidos por mosquitos (MBF), ii) flavivirus transmitidos por garrapatas (TBF), iii) flavivirus específicos deinsectos (ISF), y iv) flavivirus sin vector conocido (NKVF). El siguiente trabajo tiene como objetivo detectar e identificar los Flavivirus presentes en losmosquitos Aedes aegypti capturados en la ciudad de Resistencia. Se colectaron en la ciudad de Resistencia mosquitos adultos de manera estacionaldesde otoño 2014 hasta primavera 2015. Se utilizaron trampas de luz tipo CDC suplementadas con hielo seco. Los mosquitos adultos semantuvieron en frio hasta la determinación de especies sobre platina refrigerada con lupa binocular, los mismos fueron agrupados por sexo, estadoalimentario y fecha de captura. Se procesaron los pools de mosquitos Aedes aegypti, los cuales fueron homogeneizados con MEM y centrifugados a13.000 rpm por 30 minutos a 4°C para su descontaminación. Para la detección del genoma viral, previamente se extrajo el ARN viral con kit comercial yse realizó una retrotrascripción seguida por PCR-Nested, con cebadores degenerados. Los productos de amplificación fueron purificados y secuenciadosen ambas direcciones. Las secuencias de nucleótidos fueron editadas mediante el programa BioEdit para obtener la secuencia consenso para cadamuestra. Éstas fueron identificadas mediante la implementación del análisis de BLAST (Basic Local Alignment Search Tool). Se analizaron un total de9 pools conteniendo 72 mosquitos Aedes aegypti. El análisis molecular demostró la presencia de genoma de Flavivirus en tres pooles colectados enotoño 2014, primavera 2014 y otoño 2015. Se secuenciaron los productos de amplificación obtenidos (143pb) de dos de los pools (primavera 2014 yotoño 2014). El análisis con BLAST indicó que las secuencias corresponden, con una homología de 99%, a secuencias depositadas en la base dedatos de virus descriptos como virus Cell Fusing Agent (CFAV). CFAV es un flavivirus especifico de insectos (ISFs) y pertenece al género Flaviviruspor compartir muchas de sus características moleculares, tales como el tamaño de genoma, estructura y orden de genes. Si bien no se handetectado virus de importancia sanitaria en los pools analizados, se ha documentado que la existencia de ISFs en los mosquitos puede afectar lacompetencia vectorial para la transmisión de arbovirus patógenos a los huéspedes vertebrados. Restaría realizar mas estudios para determinar lanaturaleza de las secuencias detectadas y su interacción en la replicación de los Flavivirus que afectan la salud humana.