IIBYT   23944
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS Y TECNOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Modulación conformacional de la enzima β-Galactocidasa por el encapsulamiento en una matriz mesoporosa de gel de silicato
Autor/es:
PERILLO MA; OCHOA A; BURGOS I
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Jornada; VI Encuentro Argentino de Materia Blanda; 2016
Institución organizadora:
FAMAF, FCQ, Universidad Nacional de Córdoba, IFEG-Conicet
Resumen:
Lasíntesis de geles de silicato por el método sol-gel en condiciones suaves de pHy temperatura permite atrapar proteínas con actividad biológica mientras que noimpide la difusión de moléculas pequeñas a través de la matriz mesoporosa. Enestudios previos, determinamos que la enzima b-Galactosidasaencapsulada (Eb-Gal) presenta igual o mayor actividad catalítica quela enzima soluble y proponemos que la estructuración de las moléculas de aguaen los nano poros del gel tendría importancia significativa en las diferenciasobservadas para la hidrólisis de ONPG en geles frescos y envejecidos adiferentes periodos de tiempo. Esta observación fue sustentada por experimentosde 1H-RMN. En el presente trabajo, mediante espectroscopia de fluorescencia ydicroísmo circular (DC), se investigaron posibles cambios conformacionales quepudiera sufrir b-Gal al ser confinada en el gel de silicato. Elespectro de emisión de fluorescencia de Eb-Gal evidenciaun corrimiento del centro de masa de 3 nm hacia mayores longitudes de ondarespecto a la enzima soluble. Este efecto indica que los triptófanos de laproteína encapsulada se encuentran en un entorno menos hidrofóbico (o de mayorconstante dieléctrica) lo que podría deberse a un pérdida de compactaciónglobal de la estructura terciaria o que el agua que se encuentra en los porosdel gel tenga un valor de constante dieléctrica diferente al del agua libre.Los resultados de (DC) sugieren cambios en la estructura secundaria de Eb-Galrespecto a la forma soluble, que puede interpretarse como un aumento en laproporción de aminoácidos participando de estructura hélice-alfa.