Análisis de la expresión de genes relacionados con la resistencia a insecticidas en poblaciones susceptibles y resistentes de Triatoma infestans

CARLA G. GROSSO; BEATRIZ A. GARCÍA; MARÍA M. STROPPA

Santa Fe

Simposio; Simposio Internacional de Biología Celular y Molecular de la Enfermedad de Chagas, XXVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2016

Sociedad Argentina de Protozoología

Los programas de control de la transmisión de la enfermedad de Chagas promueven la eliminación de las poblaciones del insecto vector Triatoma infestans mediante la fumigación con insecticidas piretroides. Sin embargo, se han observado fallas en el control debido a la existencia de resistencia a los insecticidas. Entre los mecanismos que confieren resistencia a insecticidas se han descripto los que provocan un aumento de la actividad de enzimas responsables de su metabolismo. Las evidencias sugieren que las enzimas mono-oxigenasas citocromo P450 tienen comúnmente un rol primario en la resistencia a insecticidas piretroides. Incrementos en la expresión a nivel de la transcripción de genes de citocromos P450 son frecuentemente considerados responsables de aumentar el metabolismo de insecticidas y parece ser un fenómeno común en la evolución del desarrollo de resistencia en insectos. Con el propósito de investigar la participación de los citocromos P450 en la resistencia a insecticidas piretroides en T. infestans se aisló ADN copia (ADNc) de 3 genes citocromo P450 y del gen NADPH citocromo P450 reductasa (CPR) que codifica para una enzima involucrada en la transferencia de electrones desde la forma reducida de NADPH a los citocromos P450. A partir de las secuencias de ADNc de esos genes se diseñaron primers específicos y sondas Taqman para la determinación de su expresión mediante la técnica de PCR en Tiempo Real. Las determinaciones de expresión se llevaron a cabo a partir de ARN total extraído de pooles de cuerpo graso de los insectos en distintos intervalos de tiempo después de la aplicación tópica de la dosis letal 50% del principio activo deltametrina. Los resultados, revelaron que la expresión a nivel de transcripción de los tres genes P450 fue inducida por deltametrina en poblaciones susceptibles y resistentes al insecticida. Los niveles de ARNm del gen CPR, analizados en una colonia de laboratorio susceptible a deltametrina, también se incrementaron después de la aplicación del insecticida en relación a lo detectado en los individuos no expuestos. Además, se detectó sobre-expresión de uno de los genes P450 y del gen CPR en la población que presentó el mayor grado de resistencia a deltametrina. Los resultados obtenidos apoyarían la hipótesis que postula la participación de los citocromos P450 en el desarrollo de la resistencia a insecticidas piretroides en T. infestans.