La sobre-expresión del REb inhibe la expresión del REa endógeno modulando la proliferación de células tumorales adenohipofisarias GH3

PEREZ P.; PETITI J.P.; SABATINO M.; PICECH F.; GUIDO C.; DE PAUL A.; TORRES A.; GUTIÉRREZ S.

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

En estudios previos mostramos que el REb inhibe la proliferación celular adenohipofisaria mediante la modulación de reguladores del ciclo celular como ciclina D1 y p21. A continuación y considerando estos antecedentes nos propusimos dilucidar si el REb modula la expresión del REa contribuyendo así al mantenimiento del balance proliferativo adenohipofisario.Se utilizaron cultivos de células adenohipofisarias normales y tumorales GH3 (GH3b-). Esta línea celular fue transfectada para la sobre-expresión del REb (GH3b+). Se realizaron estímulos con 10 nM de E2, PPT (agonista del REa) y DPN (agonista del REb) por 72h. Se determinó la proliferación celular (con BrdU), el contenido de ADN (con yoduro de propidio) y la expresión de REa y b por western blot (WB), inmunofluorescencia (IF) y citometría de flujo. Análisis estadístico: Anova-Dunnet. La sobre-expresión del REb en células GH3 en condiciones basales inhibió la proliferación celular alrededor del 40% y disminuyó significativamente la población en fases S+G2/M del ciclo celular. Este efecto inhibitorio no mostró cambios luego del tratamiento con E2, PPT o DPN. En GH3b+ se observó una reducción significativa de la expresión del REa endógeno, la cual se mantuvo en niveles similares luego de la estimulación con E2, PPT o DPN. La expresión del REb en GH3b+ no varió con ninguno de los tratamientos aplicados. En células adenohipofisarias normales se observó por IF una inmunomarcación difusa citoplasmática del REb en el 16,97 ± 2,3% de las células, de las cuales el 91,48 ± 2,64% expresaron además el REa (15,61 ± 2,42% del total de células). Nuestros resultados muestran que el REb inhibe la expresión del REa modulando así la proliferación celular adenohipofisaria de manera ligando independiente. Además, la elevada co-expresión de los REa y b sugiere un mecanismo de acción integrado de ambos subtipos de RE en sus efectos biológicos sobre las células adenohipofisarias.