La fotoactivación de tetraacetato de riboflavina genera especies reactivas induciendo apoptosis en células tumorales con participación de la vía MAPK-ERK 1/2

ANDREA VIRGINIA JUAREZ; LILIANA DEL V. SOSA; ANA PAULA COSTA; RODRIGO BAINY LEAL; ALICIA TORRES; PATRICIA PONS

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2015

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La terapia fotodinámica (TFD) es un tratamiento contra el cáncercutáneo no melanoma, basado en la combinación de un fotosensibili-zador (FS), oxígeno y luz. Sin embargo, el desarrollo de efectivos FSes un tema de gran interés en la actualidad. Nos propusimos estudiarla efectividad de tetraacetato de riboflavina (RTA) en TFD en célulashumanas de carcinoma escamoso (SCC-13), evaluando el efecto deespecies reactivas (ER) generadas por su fotoactivación y las vías deseñalización involucradas en el mecanismo de muerte celular. CélulasSCC-13 fueron incubadas con RTA (50μM/3h) e irradiadas (9J/cm2λ446nm). Para analizar el mecanismo de muerte desencadenado porTFD se determinaron diferentes parámetros tales como: expresiónde diferentes proteínas por inmunofluorescencia y WB; generaciónde ER con 2,7-dihidrodicloro fluoresceína por citometría de flujo;análisis de la respiración mitocondrial en oxígrafo de alta resolución;contenido de glutatión reducido por tioles totales no proteicos (NPSH);producción de .- con dihidroetidio y potencial de membrana mito-condrial con JC-1 por espectrofluorometría. Estadística: ANOVA dedos vías. Luego de la TFD-RTA, se observó expresión de citocromoc en citoplasma, disminución en la expresión de pro-caspasa 3 y Bcl2y aumento de ERK1/2 fosforilada. Sin embargo, la terapia no indujocambios de expresión de la proteína pro-apoptótica Bax ni de p-p38.La TFD-RTA generó altos niveles de ER, aumento de .en el potencial de membrana mitocondrial. Además, se detectó unincremento en los niveles de NPSH, lo que podría ser un mecanismode defensa antioxidante generado por las células para contrarrestar eldaño oxidativo. En conjunto, estos resultados permiten inferir que lageneración de ER por la aplicación de RTA-TFD, serían activadoresde la vía intrínseca de muerte apoptótica con participación de MAPK/ERK1/2 en células SCC-13, indicando que el RTA sería un efectivofotosensibilizador en la aplicación de TFD.