LA SOBRE-EXPRESIÓN DEL FACTOR SOX2 INDUCE UN CAMBIO MORFO-FUNCIONAL DE CÉLULAS TUMORALES HIPOFISARIAS GH3 HACIA UN FENOTIPO INDIFERENCIADO

GUIDO, CAROLINA; VACA, ALICIA; SOSA, LILIANA; VELAZQUEZ, FABIOLA; PEREZ, PABLO; CAPUTTO, BEATRIZ; GUTIERREZ, SILVINA; MUKDSI, JORGE; TORRES, ALICIA

Congreso; SAIC 2015; 2015

Resultados previos han permitido inferir que células hipofisarias que expresan marcadores de células stem (CS) y cancer stem cells (CSC) estarían involucradas en la etapas tempranas del desarrollo tumoral. Recientemente, en adenomas hipofisarios se ha descripto que la sobre-expresión del factor de transcripción Sox2, asociado a CS, estaría vinculada a la progresión tumoral. El objetivo de este trabajo fue seleccionar y caracterizar la población de células que crecen en suspensión como esferoides y expresan marcadores de CS y CSC a partir de cultivos primarios de tumores hipofisarios. Además, se propone analizar si la sobreexpresión de Sox2 modifica el comportamiento de la línea tumoral hipofisaria GH3. Se utilizaron cultivos de tumores hipofisarios de ratas hembras Fischer estrogenizadas por 30 días, con medios de selección para la obtención de pituesferas y de células GH3 transducidas con un vector retroviral que expresa Sox2 y GFP. Se realizó inmunofluorescencia para la detección de marcadores asociados a CS y CSC y análisis morfológico ultraestructural. Se determinó el metabolismo y la viabilidad celular en GH3 por ensayo de AlamarBlue. Las pituesferas obtenidas fueron positivas para GFRa2, Sox2, Oct4, Nestin, CD133 y CD44 y luego de la diferenciación con medio suplementado expresaron S100, vimentina y GFAP. La sobre-expresión de Sox2 en células GH3 indujo cambios ultraestructurales indicativos de indiferenciación celular incrementando además, el número de figuras mitóticas, la capacidad de formar esferoides, el metabolismo y la viabilidad celular con respecto a las GH3 control. Los resultados obtenidos demuestran que las pituesferas aisladas en cultivo poseen capacidad pluripotente y estarían involucradas en el desarrollo de adenomas hipofisarios. La formación de esferoides y las características morfológicas de células GH3 que sobre-expresan Sox2 evidencian un fenotipo más indiferenciado, sugiriendo un rol activo de este factor en la tumorogénesis hipofisaria