Efectos de interleuquina 6 en la regulación de la proliferación y senescencia de células hipofisarias normales y tumorales en cultivo primario

GENOVESE DM; SABATINO ME; GRONDONA E; TORRES AL; DE PAUL AL

Córdoba

Jornada; XVI Jornada de investigación científica de la facultad de ciencias médicas; 2015

Facultad de Ciencias Médicas. U.N.C.

La senescencia es considerada como una respuesta al estrés y está caracterizada por un arrestoestable del ciclo celular y aumentos en la expresión de interleuquina 6 (IL-6), necesaria para lainducción y mantenimiento de este proceso.Nos propusimos evaluar los efectos de IL-6 exógena y endógena sobre la proliferación ysenescencia de células hipofisarias normales y tumorales.Se realizaron cultivos primarios adenohipofisarios de ratas macho Wistar adultas a las que se indujoel tumor con capsulas de benzoato de estradiol durante 40 días (E40). Controles fueron implantadoscon capsulas vacías (n=8/cultivo). Los cultivos fueron expuestos a IL-6 exógena (1-10ng/mL; 24h).Los efectos de IL-6 endógena fueron evaluados mediante el desafío con lipopolisacárido bacteriano(LPS; 0,1-2μg/mL; 24h). Además, las células se incubaron con Brefeldin-A, bloqueante de lasecreción (BFA; 0,1μg/mL; 2h) o BAY, inhibidor de la translocación nuclear de NF-kB (1μg/ml,24h) solos o combinados con LPS.Se analizó: actividad de β-galactosidasa asociada a senescencia (SA-β-gal) por ensayoscitoquímicos, proliferación por inmunocitoquímica de Ki67, expresión de IL-6 porinmunofluorescencia (IF), secreción mediante ELISA y expresión de NF-kB por western blot.Análisis estadístico: MLGM y Test de Fisher (p