INICSA   23916
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS DE LA SALUD
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
La fotoactivación de Tetraacetato de riboflavina genera especies reactivas induciendo apoptosis en células tumorales con participación de la vía MAPK-ERK1/2
Autor/es:
JUAREZ AV; SOSA LDV; COSTA AP; LEAL RB; TORRES A I; PONS P
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; Reunión anual de la Sociedad de Fisiología, SAIC-SAFIS.; 2015
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
La terapia fotodinámica (TFD) es un tratamiento contra el cáncer cutáneo no melanoma, basado en la combinación de unfotosensibilizador (FS), oxígeno y luz. Sin embargo, el desarrollo deefectivos FS es un tema de gran interés en la actualidad. Nospropusimos estudiar la efectividad de tetraacetato de riboflavina (RTA)en TFD en células humanas de carcinoma escamoso (SCC-13),evaluando el efecto de especies reactivas (ER) generadas por su fotoactivación y las vías de señalización involucradas en el mecanismo de muerte celular. Células SCC-13 fueron incubadas con RTA(50µM/3h) e irradiadas (9J/cm2, λ446nm). Para analizar el mecanismo de muerte desencadenado por TFD se determinaron diferentes parámetros tales como: expresión de diferentes proteínas por inmunofluorescencia y WB; generación de ER con 2,7-dihidrodicloro fluoresceína por citometría de flujo; análisis de la respiraciónmitocondrial en oxígrafo de alta resolución; contenido de glutatión reducido por tioles totales no proteicos (NPSH); producción de .O2- con dihidroetidio y potencial de membrana mitocondrial con JC-1 por espectrofluorometría. Estadística: ANOVA de dos vías. Luego de la TFD-RTA, se observó expresión de citocromo c en citoplasma, disminución en la expresión de pro-caspasa 3 y Bcl2 y aumento de ERK1/2 fosforilada. Sin embargo, la terapia no indujo cambios de expresión de la proteína pro-apoptótica Bax ni de p-p38. La TFD-RTA generó altos niveles de ER, aumento de .O2-, sin variación en el potencial de membrana mitocondrial. Además, se detectó un incremento en los niveles de NPSH, lo que podría ser un mecanismo de defensa antioxidante generado por las células para contrarrestar el daño oxidativo. En conjunto, estos resultados permiten inferir que la generación de ER por la aplicación de RTA-TFD, serían activadores de la vía intrínseca de muerte apoptótica con participación deMAPK/ERK1/2 en células SCC-13, indicando que el RTA sería un efectivo fotosensibilizador en la aplicación de TFD.