El ácido litocólico previene la inhibición producida por el deoxicolato de sodio sobre la absorción intestinal de calcio

MARCHIONATTI AM; PEREZ A; RIVOIRA M.A; RODRÍGUEZ V; TOLOSA DE TALAMONI N

Bs As

Congreso; XXXI Reunión Anual de la AAOMM; 2014

Los ácidos biliares (AB) y sus sales son los componentes más importantes de la bilis. Los ácidos litocólico (LCA) y deoxicólico (DXC) son ácidos biliares secundarios originados a partir de los primarios por acción de la microflora del intestino. En concentraciones elevadas son citotóxicos y han sido involucrados en la patogénesis de ciertas enfermedades tales como el cáncer de colon. En un trabajo previo en nuestro laboratorio se demostró que el DXC, por un mecanismo oxidativo, inhibe la absorción intestinal de Ca+2 y afecta la supervivencia celular (Rivoira y col., Comp. Biochem. Physiol., 2012). En base a estos resultados el objetivo del presente trabajo fue determinar si LCA tiene capacidad de prevenir el efecto inhibitorio del DXC y conocer el efecto individual que el LCA puede desencadenar en el intestino y sus implicancias sobre la vía de absorción intestinal de calcio. Se utilizaron pollos de 4 semanas de edad tratados en el saco intestinal con: 1) solución fisiológica (controles), 2) DXC (10 mmol/L), 3) LCA (200 µmol/L) y 4) tratados con LCA+DXC por 30 minutos. La absorción de calcio se midió por la técnica del asa intestinal ligada in situ. En mucosa duodenal se analizó la expresión génica y proteica por RT-PCR en tiempo real y por Western blot, respectivamente, de Ca+2-ATPasa, intercambiador Na+/Ca+2 y calbindina D28k. También se analizó la expresión génica de claudina 2, 12 y TRPV6. Además, se midieron por espectrofotometría las actividades de fosfatasa alcalina (FA) y el contenido de grupos carbonilos de las proteínas. En mitocondrias aisladas de enterocitos, se estudió por espectrofotometría, los cambios en la permeabilidad de la membrana interna mitocondrial. Los resultados se evaluaron estadísticamente mediante ANOVA a una vía, seguido del test de Bonferroni. Los resultados indican que LCA solo no alteró la absorción intestinal de Ca2+, mientras que el tratamiento combinado previno el efecto inhibitorio causado por DXC sobre la absorción intestinal de calcio y retornó los valores de expresión génica y proteica de Ca+2-ATPasa, intercambiador Na+/Ca+2 y calbindina D28k, moléculas involucradas en la vía transcelular, al valor control. LCA evitó el incremento en el contenido de grupos carbonilos de las proteínas, la disminución de la actividad de FA intestinal y la alteración de la permeabilidad interna mitocondrial producida por DXC. En conclusión, LCA previno el efecto inhibitorio producido por DXC sobre la vía transcelular de la absorción del Ca2+, al menos en parte, por bloqueo del estrés oxidativo.