INICSA   23916
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS DE LA SALUD
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
La expresion de beta-Galactosidasa asociada a senescencia en celulas adenohipofisarias esta influenciada por las condiciones de cultivo.
Autor/es:
GRONDONA EZEQUIEL; SABATINO MARIA EUGENIA; GENOVESE DARIO; DE PAUL ANA LUCIA
Lugar:
Cordoba
Reunión:
Jornada; Jornadas de Investigacion Cientificas de la Facultad de Ciencias Medicas; 2014
Resumen:
La senescencia celular (SC) está caracterizada por un arresto del ciclo celular que puede ser desencadenado por diferentes Tipos de estrés y se la asocia a la supresión intrínseca del desarrollo tumoral. Uno de sus indicadores más extendidos es la detección citoquímica de beta-galactosidasa (SAbeta-Gal). Sin embargo, su especificidad como marcador de SC in vitro es controvertida. En un modelo in vivo de hiperplasia hipofisaria demostramos evidencias del proceso de SC a través de diversos marcadores, entre ellos, SA-beta-Gal. Para profundizar el estudio de SC in vitro, nos propusimos analizar la influencia de las condiciones de cultivo sobre la expresión de SA-beta-Gal en hipófisis normales. Adenohipófisis de ratas Wistar macho adultas en cultivo primario (n=8 por cultivo) fueron expuestas a las siguientes variables: tiempo (0, 24, 48, 72h), presencia/ausencia de suero (de caballo y fetal bovino, 11%), y antibióticos penicilina/estreptomicina (0%, 50%, 100%). Posteriormente, para cada condición experimental se analizó la expresión de SA-beta-Gal mediante la cuantificación del número de células positivas sobre el total de células contadas. Analisis estadístico: procedimiento logit link para datos con distribución binomial y Test de Fisher (p<0,05). Luego de 24h de cultivo se observó un incremento significativo de células SA-beta-Galpositivas con respecto a 0h tanto en presencia como en ausencia de suero, aunque los mayores valores fueron detectados bajo la primera condición. Sin embargo, hacia las 48h, la ausencia de suero en el medio de cultivo provocó una abrupta disminución en el número de células SA-beta-Gal-positivas en tanto que esta reducción fue leve en presencia de suero sugiriendo la existencia de factores inductores de la expresión de SA-beta-Gal in vitro. Además, presencia de antibióticos no afectó significativamente el número de células SA-beta-Gal positivas en los tiempos analizados. Estos resultados indican que el tiempo de cultivo como la presencia de suero en el medio de incubación afectan la expresión de SA-beta-Gal en células hipofisarias por lo que su empleo como único indicador de SC in vitro debe ser considerado. Los datos exponen la necesidad de valorar las condiciones de cultivo para cada tipo celular así como emplear múltiples marcadores para el estudio de la SC in vitro.in vitro es controvertida. En un modelo in vivo de hiperplasia hipofisaria demostramos evidencias del proceso de SC a través de diversos marcadores, entre ellos, SA-beta-Gal. Para profundizar el estudio de SC in vitro, nos propusimos analizar la influencia de las condiciones de cultivo sobre la expresión de SA-beta-Gal en hipófisis normales. Adenohipófisis de ratas Wistar macho adultas en cultivo primario (n=8 por cultivo) fueron expuestas a las siguientes variables: tiempo (0, 24, 48, 72h), presencia/ausencia de suero (de caballo y fetal bovino, 11%), y antibióticos penicilina/estreptomicina (0%, 50%, 100%). Posteriormente, para cada condición experimental se analizó la expresión de SA-beta-Gal mediante la cuantificación del número de células positivas sobre el total de células contadas. Analisis estadístico: procedimiento logit link para datos con distribución binomial y Test de Fisher (p<0,05). Luego de 24h de cultivo se observó un incremento significativo de células SA-beta-Galpositivas con respecto a 0h tanto en presencia como en ausencia de suero, aunque los mayores valores fueron detectados bajo la primera condición. Sin embargo, hacia las 48h, la ausencia de suero en el medio de cultivo provocó una abrupta disminución en el número de células SA-beta-Gal-positivas en tanto que esta reducción fue leve en presencia de suero sugiriendo la existencia de factores inductores de la expresión de SA-beta-Gal in vitro. Además, presencia de antibióticos no afectó significativamente el número de células SA-beta-Gal positivas en los tiempos analizados. Estos resultados indican que el tiempo de cultivo como la presencia de suero en el medio de incubación afectan la expresión de SA-beta-Gal en células hipofisarias por lo que su empleo como único indicador de SC in vitro debe ser considerado. Los datos exponen la necesidad de valorar las condiciones de cultivo para cada tipo celular así como emplear múltiples marcadores para el estudio de la SC in vitro.