CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

El agregado del residuo palmitato al receptor estrogénico α (REα) es un paso crítico en los efectos rápidos inducidos por E2, ya que posibilita el tráfico del receptor hacia la membrana plasmática, siendo aún desconocido si esta modificación posttraduccional ocurre en hipófisis. En este trabajo nos propusimos determinar la palmitoilación del REα en células adenohipofisarias y su implicancia en el efecto del E2 iniciado en la membrana plasmática que desencadena la proliferación celular. Cultivos primarios adenohipofisarios de rata Wistar hembra y de la línea tumoral GH3 fueron tratados con E2 (10nM) por 30 min. La palmitoilación del REα fue evaluada por el método de intercambio acil-biotina (ABE) y los niveles de ARNm de las palmitoilasas DHHC-7 y -21 se determinaron por RT-PCR luego de 24h de estímulo con E2. El efecto proliferativo fue cuantificado mediante la incorporación de BrdU observada luego de 24h por inmunocitoquímica. La expresión del REα y ERK total y fosforilada fue analizada por WB. Además, se utilizó el inhibidor de la palmitoilación: 2bromo palmitato (2BP, 10 μM). Estadística: Test-t. En cultivos primarios el estímulo con E2 indujo la palmitoilación del REα, mientras que en células GH3 la palmitoilación basal del REα aumentó con el tratamiento de E2. La expresión del ARNm de DHHC-7 y DHHC-21, enzimas involucradas en la palmitoilación de los receptores esteroideos endógenos fue evidenciada en células normales y tumorales. En cultivos primarios el estímulo de E2 no produjo cambios en la actividad mitogénica de lactotropas. Mientras que, E2 indujo un aumento significativo de la proliferación de células tumorales, en forma coincidente con la fosforilación de ERK1/2, efectos que fueron parcialmente inhibidos por pre-incubación con 2BP. Estos resultados sugieren que la palmitoilación del REα contribuiría en los efectos del E2 iniciados en la membrana plasmática desencadenando la proliferación de células tumorales adenohipofisarias.