Efectos opuestos del deoxicolato de sodio y del ácido ursodeoxicólico sobre la captación intestinal de Ca+2 y la vía extrínseca de la apoptosis

RODRÍGUEZ V. A; RIVOIRA M.A; PEREZ A; MARCHIONATTI AM; TOLOSA DE TALAMONI N. G

Córdoba

Jornada; XVI Jornada Anual Científica de la Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba (SEMCO); 2014

Trabajos previos en nuestro laboratorio han demostrado que el deoxicolato de sodio (NaDOC) inhibe la absorción intestinal de Ca+2 mediante estrés oxidativo y desencadenamiento de la vía intrínseca de la apoptosis, mientras que el ácido ursodeoxicólico (UDCA) favorece la absorción intestinal de Ca+2. El objetivo de este trabajo fue estudiar el efecto de NaDOC y UDCA, individual y conjunto, sobre la captación de Ca+2 en enterocitos con distinto grado de diferenciación y su implicancia en la absorción intestinal de Ca+2. Además, se analizó el efecto de dichos ácidos sobre la expresión proteica de moléculas involucradas en la vía extrínseca de la apoptosis. Se utilizaron ratas Wistar machos adultas (n=6 por grupo): 1) controles, 2) tratadas con NaDOC (10 mM), 3) tratadas con UDCA (60 µg/100g peso corporal) y 4) tratadas con NaDOC+UDCA, por vía luminal durante 30 minutos. Los enterocitos se obtuvieron con distinto grado de maduración por estimulación mecánica y la captación de Ca+2 se realizó mediante el uso de Cl2Ca marcado con 45Ca+2. La expresión proteica de Fas (receptor APO-1 o CD95), FasL (ligando de Fas), pro-caspasa 8 y caspasa 8 se analizó por Western blot. Los resultados se evaluaron mediante ANOVA a una vía, seguido del test de Bonferroni. Los valores de captación de Ca+2 fueron menores en enterocitos maduros de ratas tratadas con NaDOC mientras que los enterocitos de ratas tratadas con UDCA y NaDOC + UDCA presentaron valores similares a los controles. La expresión de proteínas involucradas en la vía extrínseca de la apoptosis se modificó con el tratamiento de los ácidos biliares. El NaDOC aumentó la expresión de Fas y FasL, mientras que UDCA disminuyó la expresión de estas proteínas con respecto al control. La expresión proteica de ambas proteínas en el grupo tratado con NaDOC + UDCA fue similar a la del grupo control. En cuanto a la caspasa iniciadora 8, el NaDOC produjo disminución de la expresión de pro-caspasa 8 y aumento en la expresión de caspasa 8 activa. UDCA y el tratamiento combinado no modificaron los niveles de expresión proteica de estas moléculas respecto a la de los controles. En enterocitos inmaduros la captación de Ca+2 permaneció invariable con los distintos tratamientos. La expresión proteica de Fas y FasL aumentó solamente con NaDOC. En conclusión, NaDOC disminuye la absorción del catión porque inhibe la captación de Ca+2 en enterocitos maduros debido, al menos en parte, por estimulación de la vía extrínseca de la apoptosis. Por el contrario, UDCA bloquea la apoptosis en enterocitos maduros y previene los efectos adversos del NaDOC impidiéndose así la inhibición de la absorción intestinal del catión.