Implicancia de la palmitoilacion en el efecto del 17beta-estradiol sobre la actividad funcional de celulas lactotropas

SOSA LILIANA DEL VALLE; GUTIERREZ SILVINA; PETITI JUAN PABLO; VACA ALICIA MALDRE; DE PAUL ANA LUCIA; TORRES ALICIA

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Investigaci¡¡¨¬®n Clinica (SAIC); 2013

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Modificaciones post-traduccionales del receptor estrogenico alfa (REa) entre las que se incluyen la adicion de un acido graso (S-acilacion, comunmente denominada palmitoilacion), promueven la interaccion con la membrana plasmatica en diferentes tipos celulares. Previamente identificamos un pool del REa en la membrana plasmatica de celulas lactotropas demostrando que su expresion es incrementada por 17b-estradiol (E2). En este trabajo nos propusimos analizar la implicancia de la palmitoilacion en los efectos rapidos del E2 y genomicos en interaccion con FGF2, mediados por los REa de membrana (REam). Cultivos primarios adenohipofisarios de rata Wistar hembra fueron tratados con: E2 (10nM) por 5,15, 30 min solo o co-incubados con FGF2 (10ng/ml). Ademas, se utilizo el inhibidor de la palmitoilacion: 2bromo palmitato (2BP, 10 nM). Los efectos rapidos del E2 fueron evaluados por la cuantificacion de PRL secretada y los iniciados en la membrana que desencadenan acciones genomicas, por valoracion de la proliferacion de lactotropas, 24hs posterior incorporacion de BrdU (ICQ PRL/BrdU). El REam y caveolina-1(cav-1) fueron identificados por ICQ al microscopio electronico (ME) y confocal (MC). La expresion de ERK total y fosforilada fue analizada por WB. Estadistica: ANOVA-Tukey. Mediante MC el REa fue observado en nucleo y citoplasma de celulas controles y posterior al estimulo con E2 fue detectado ademas en la membrana plasmatica colocalizando con cav-1. La interaccion del REa y cav-1 fue confirmada por ME. La secrecion de PRL incremento luego del estimulo con E2 siendo inhibida por 2BP, la cual se correlaciono con una disminucion de ERK1/2 fosforilada. La actividad mitogenica de lactotropas fue incrementada por E2/FGF2, observandose que la inhibicion de la palmitoilacion suprimio la proliferacion y la fosforilacion de ERK1/2. Estos resultados sugieren que la palmitoilacion podrian regular los efectos del E2 mediados por los REam sobre la actividad funcional de las celulas lactotropas.