CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

TGFb1 induce arresto de celulas adenohipofisarias tumorales a traves de la via Smad2/3, la cual puede ser regulada por las señalizaciones MAPK y PI3K. Estas vias proliferativas son activadas por el receptor HER2, cuya sobre-expresion ha sido informada en tumores adenohipofisarios. Nuestro objetivo fue determinar si la respuesta anti-proliferativa del TGFb1/Smad es modulada por HER2 a traves de MAPK y PI3K. Cultivos de celulas GH3B6 y GH4C1 se trataron con TGFb1 (4ng/ml, 30 min o 24h) solo o con una pre-incubacion de 1 h con los inhibidores: Trastuzumab (HER2, 400 µg/ml), LY294002 (PI3K 10µM) o PD98059 (MEK1/2; 50µM). Se analizo el ciclo celular por citometria de flujo. La interaccion de Smad2/3 con ERK1/2 o Akt fue determinada por inmunoprecipitacion y posterior Western Blot. La translocacion subcelular de Smad2/3, ERK1/2, y Akt fue observada por microscopia confocal y electronica. Estadistica: ANOVA-Fisher. El TGFb1 indujo arresto en la fase G0/G1, efecto que fue potenciado cuando ambas lineas celulares fueron pre-incubadas con los inhibidores de MEK1/2 y PI3K. En celulas GH4C1, la co-incubacion de TGFb1/trastuzumab aumento el efecto anti-proliferativo de ambos factores solos. En celulas GH3B6 no se observo respuesta al trastuzumab, en coincidencia con la baja expresion de EGFR detectada en esta linea celular comparada con células GH4C1. Los ensayos de inmunoprecipitacion mostraron interaccion de Smad2/3 con ERK1/2 o Akt. Estas asociaciones fueron incrementadas por TGFb1, efecto que fue bloqueado luego de la pre-incubacion con LY294002 o PD98059. Por microscopia confocal y electronica se observo co-localizacion de Smad2/3 con ERK1/2 o Akt. Estos resultados demuestran que el efecto anti-mitogenico de TGFβ1 en celulas tumorales adenohipofisarias es contrabalanceado por las vias MAPK y PI3K. Ademas sugieren que el receptor HER2 regularia la proliferacion tumoral adenohipofisaria y la señal TGFβ1/Smad2/3, convirtiendolo en un atractivo blanco terapeutico.