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DL-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA INCREMENTA EL EFECTO ANTITUMORAL DEL CALCITRIOL EN CÉLULAS INTESTINALES NEOPLÁSICAS Liaudat AC, Bohl LP, Tolosa de Talamoni NG, Picotto G Laboratorio ?Dr F Cañas?, Cátedra de Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de Ciencias Médicas. INICSA (CONICET-UNC) El cáncer colorrectal es una de las causas más importantes de muerte por tumores malignos en el mundo. La incidencia y el pronóstico de esta enfermedad están en estrecha relación con los niveles plasmáticos de 25(OH)D3, metabolito indicador del estado nutricional de vitamina D. Por otro lado, la inclusión de drogas oxidantes tales como D,L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), aumentan la sensibilidad de las células neoplásicas a los tratamientos, especialmente en cánceres resistentes a la terapia convencional. El objetivo de nuestro trabajo fue determinar el efecto del calcitriol y BSO sobre la proliferación de las células de cáncer de colon y evaluar los posibles mecanismos involucrados. Para ello, las células Caco-2, derivadas de adenocarcinoma de colon humano, se trataron con calcitriol (D) (200 nM), BSO (100 μM), con ambas drogas o etanol (vehículo) a distintos tiempos de exposición. La proliferación celular se determinó por la técnica de cristal violeta. La actividad de las enzimas del sistema antioxidante superóxido dismutasa (SOD) y catalasa (CAT), así como la enzima marcadora de diferenciación celular fosfatasa alcalina (FAL) y los niveles de glutatión (GSH) se midieron por espectrofotometría. El potencial de membrana mitocondrial (ΔΨm) y el ciclo celular se evaluaron por citometría de flujo y la fragmentación del ADN mediante la técnica de TUNEL. La morfología nuclear se observó a través de la tinción con DAPI. Los resultados se analizaron estadísticamente mediante el test de ANOVA a una vía seguido del test de Bonferroni como post-hoc. Los resultados demuestran que tanto D como BSO inhibieron el crecimiento de las células Caco-2, efecto que resultó mayor con el tratamiento combinado. El contenido total de GSH disminuyó a las 6 y 48 h con BSO y con BSO + D. A las 96 h la actividad de CAT aumentó sólo con el tratamiento combinado y la actividad de SOD no se modificó en ningún tiempo evaluado. BSO + D indujo arresto del ciclo celular en fase S/G2 a las 48 h de exposición y posteriormente se observó una disminución del número de células en mitosis (96 h). La actividad de FAL y el número de células con el ΔΨm alterado se acrecentaron en las células tratadas con D y con ambas drogas durante 96 h. En conclusión, BSO incrementa el efecto antiproliferativo del calcitriol sobre las células Caco-2 mediante aumento del estrés oxidativo, arresto del ciclo celular e inducción de fragmentación del ADN. El incremento de FAL sugiere una inducción de la diferenciación celular debida al calcitriol.