Efecto del REbeta sobre reguladores del ciclo en células adenohipofisarias normales y tumorales

PÉREZ, P.; PETITI JP; SABATINO ME; DE PAUL AL; TORRES AI; GUTIÉRREZ S

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas; 2013

Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas

En estudios previos mostramos disminución en la expresión del receptor estrogénico β (REβ) durante el desarrollo de una lesión hiperplásica/adenomatosa hipofisaria. En continuación, para investigar la implicancia del REβ en el control proliferativo adenohipofisario, analizamos la expresión de reguladores del ciclo celular en células normales y tumorales. Se utilizaron cultivos primarios adenohipofisarios de rata Wistar estimulados con 17β-estradiol (E2) o con el agonista del REβ (DPN) por 72h y glándulas hiperplásicas/ adenomatosas generadas con benzoato de estradiol por 20, 40 y 60d. Se inmunomarcaron los REα y β por microscopía confocal (MC) y electrónica (ME) y se cuantificó su expresión por citometría de flujo. Se determinó la expresión de ciclina D1, CDK4, p21 y d el supresor tumoral PTEN por western blot y se localizaron mediante ME y MC. Se determinó la progresión del ciclo celular con ioduro de propidio. Análisis estadístico ANOVA-Tuckey. En el modelo hiperplásico adenomatoso se observó una disminución gradual en la expresión de REβ y PTEN, mientras que los niveles de ciclina D1, CDK4 y p21 citoplasmático incrementaron en correlación con el aumento del número de células en fase S/G2M, sugiriendo que el REβ podría estar involucrado en la regulación del ciclo celular. En el cultivo primario, E2 aumentó la expresión de las proteínas mencionadas anteriormente, mientras que DPN inhibió PTEN y p21, sin modificar ciclina D1 y CDK4. Además, mediante MC se observó localización principalmente citoplasmática de p21 en células tumorales y normales controles y tratadas con E2, siendo sólo el estímulo con DPN capaz de incrementar su expresión nuclear. Estos resultados sugieren que el REβ ejercería un posible rol inhibidor del ciclo celular mediado por p21. La activación del REβ por su agonista específico induce una expresión proteica diferencial de los reguladores del ciclo celular analizados, comparada con la mediada por ambos subtipos de RE (α/β) estimulados por E2.