INICSA   23916
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS DE LA SALUD
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
DL-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA Y CALCITRIOL INHIBEN LA PROLIFERACIÓN DE LAS CÉLULAS CACO-2 MEDIANTE INDUCCIÓN DE ESTRÉS OXIDATIVO Y ARRESTO DEL CICLO CELULAR
Autor/es:
LIAUDAT AC; BOHL LP; TOLOSA DE TALAMONI NG; PICOTTO G
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013
Resumen:
La incidencia y el pronóstico del cáncer de colon están en estrecha relación con los niveles plasmáticos de calcitriol (D). Por otro lado, la inclusión de drogas que deplecionan glutatión (GSH), tal como D,L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), aumentan la sensibilidad celular a los tratamientos. El objetivo del trabajo fue determinar el efecto del calcitriol y BSO sobre la proliferación de las células de cáncer de colon Caco-2 y evaluar los posibles mecanismos involucrados. Las células se trataron con D 200 nM,  BSO 100 µM, con BSO+D o vehículo a diferentes tiempos. La proliferación celular se determinó por la técnica de violeta de cristal. Los niveles de GSH y la actividad de las enzimas superóxido dismutasa (SOD), catalasa (CAT) y fosfatasa alcalina (FAL) se midieron por espectrofotometría. El potencial de membrana mitocondrial (ΔΨm) y el ciclo celular se evaluaron por citometría de flujo. La morfología nuclear se observó a través de la tinción con DAPI, la fragmentación del ADN por la técnica de TUNEL y la expresión génica de Bcl-2 por qPCR. El análisis estadístico se realizó por ANOVA y Bonferroni como post-hoc. Los resultados muestran que D y BSO inhibieron la proliferación de las células Caco-2. El GSH disminuyó a las 6 y 48 h con BSO y BSO+D. A las 96 h CAT aumentó sólo con el tratamiento combinado, el ΔΨm disminuyó con D y BSO+D y SOD no se modificó. El tratamiento combinado indujo arresto del ciclo celular en fase S+G2/M y disminución de las células en mitosis. La fragmentación del ADN aumentó con BSO, D y BSO+D. Los niveles de ARNm de Bcl-2 disminuyeron con BSO y con el tratamiento combinado. FAL incrementó en las células tratadas con D y con ambas drogas durante 96 hs. En conclusión, BSO incrementa el efecto antiproliferativo de calcitriol sobre las células Caco-2 mediante aumento del estrés oxidativo, arresto del ciclo celular y fragmentación del ADN. El incremento de FAL sugiere una inducción de la diferenciación celular.