DL-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA INCREMENTA EL EFECTO ANTITUMORAL DEL CALCITRIOL EN CÉLULAS INTESTINALES NEOPLÁSICAS

LIAUDAT AC; BOHL LP; TOLOSA DE TALAMONI NG; PICOTTO G

Congreso; XXX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral; 2013

El c¨¢ncer colorrectal es una de las causas m¨¢s importantes de muerte por tumores malignos en el mundo. La incidencia y el pron¨®stico de esta enfermedad est¨¢n en estrecha relaci¨®n con los niveles plasm¨¢ticos de 25(OH)D3, metabolito indicador del estado nutricional de vitamina D. Por otro lado, la inclusi¨®n de drogas oxidantes tales como D,L-butionina-S,R-sulfoximina (BSO), aumentan la sensibilidad de las c¨¦lulas neopl¨¢sicas a los tratamientos, especialmente en c¨¢nceres resistentes a la terapia convencional. El objetivo de nuestro trabajo fue determinar el efecto del calcitriol y BSO sobre la proliferaci¨®n de las c¨¦lulas de c¨¢ncer de colon y evaluar los posibles mecanismos involucrados. Para ello, las c¨¦lulas Caco-2, derivadas de adenocarcinoma de colon humano, se trataron con calcitriol (D) (200 nM),  BSO (100 ¦ÌM), con ambas drogas o etanol (veh¨ªculo) a distintos tiempos de exposici¨®n. La proliferaci¨®n celular se determin¨® por la t¨¦cnica de cristal violeta. La actividad de las enzimas del sistema antioxidante super¨®xido dismutasa (SOD) y catalasa (CAT), as¨ª como la enzima marcadora de diferenciaci¨®n celular fosfatasa alcalina (FAL) y los niveles de glutati¨®n (GSH) se midieron por espectrofotometr¨ªa. El potencial de membrana mitocondrial (¦¤¦·m) y el ciclo celular se evaluaron por citometr¨ªa de flujo y la fragmentaci¨®n del ADN mediante la t¨¦cnica de TUNEL. La morfolog¨ªa nuclear se observ¨® a trav¨¦s de la tinci¨®n con DAPI. Los resultados se analizaron estad¨ªsticamente mediante el test de ANOVA a una v¨ªa seguido del test de Bonferroni como post-hoc. Los resultados demuestran que tanto D como BSO inhibieron el crecimiento de las c¨¦lulas Caco-2, efecto que result¨® mayor con el tratamiento combinado. El contenido total de GSH disminuy¨® a las 6 y 48 h con BSO y con BSO + D. A las 96 h la actividad de CAT aument¨® s¨®lo con el tratamiento combinado y la actividad de SOD no se modific¨® en ning¨²n tiempo evaluado. BSO + D indujo arresto del ciclo celular en fase S/G2 a las 48 h de exposici¨®n y posteriormente se observ¨® una disminuci¨®n del n¨²mero de c¨¦lulas en mitosis (96 h). La actividad de FAL y el n¨²mero de c¨¦lulas con el ¦¤¦·m alterado se acrecentaron en las c¨¦lulas tratadas con D  y con ambas drogas durante 96 h. En conclusi¨®n, BSO incrementa el efecto antiproliferativo del calcitriol sobre las c¨¦lulas Caco-2 mediante aumento del estr¨¦s oxidativo, arresto del ciclo celular e inducci¨®n de fragmentaci¨®n del ADN. El incremento de FAL sugiere una inducci¨®n de la diferenciaci¨®n celular debida al calcitriol.