Terapia fotodinámica basada en ALA como tratamiento anticancerígeno en células leucémicas.

DIEZ B; GARCIA M; CORDO RUSSO R; TEIJO MJ; HAJOS S; BATTLE A; FUKUDA H

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; LIII Reunión Anual de la SAIC y Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS).; 2008

La terapia fotodinámica (TFD) basada en ácido 5-aminolevúlico (ALA) es útil para erradicar células malignas mediante la fotoactivación de porfirinas endógenas sintetizadas a partir del precursor ALA. En este trabajo utilizamos células de leucemia murina: LBR- (sensible a drogas antineoplásicas), LBR-D160 (resistente a doxorubicina) y LBR-V160 (resistente a vincristina). Evaluamos la localización intracelular de la protoporfirina (PpIX) sintetizada a partir de ALA mediante microscopía confocal, utilizando  marcadores mitocondriales  y lisosomales (Mito Tracker Green y Lyso Tracker Green). En las tres líneas celulares estudiadas se observó un patrón similar de localización de PpIX. A tiempos cortos de incubación con ALA 0.1 mM (2- 3 h) la PpIX se localiza principalmente en mitocondrias y también en lisosomas, a las 20 h de incubación el patrón de fluorescencia se vuelve más difuso, indicando una redistribución en el citoplasma celular. La localización de PpIX  sugiere que la apoptosis podría constituir un mecanismo de muerte asociado a la TFD.  Teniendo esto en cuenta, se evaluó la inducción de apoptosis (naranja de acridina-bromuro de etidio) irradiando a distintos tiempos luego de incubar con ALA. Observamos que la apoptosis aumenta en función del tiempo de irradiación (% de apoptosis 1 h post-TFD: LBR- a 10 min: 15,94 ± 2,1; 20 min: 24,97 ± 1,9). En la línea sensible LBR- la inducción de apoptosis fue más lenta que en las líneas resistentes (% apoptosis  2 h post-TFD: LBR-: 43,81 ± 1,3; LBR-D160: 63,86 ± 0,6; LBR-V160: 70,57 ± 1,6; % apoptosis  3 h post-TFD: LBR-: 73,78 ± 1,8 ; LBR-D160: 73,87 ± 2,3; LBR-V160: 69,99 ± 2,4). La línea LBR-V160 fue la de mayor síntesis de PpIX y a 2 h post-TFD presentó el mayor % de apoptosis, por lo que sería la más sensible al tratamiento.  Los resultados obtenidos sugieren que la TFD constituye una alternativa eficaz para la erradicación de células malignas remanentes en el tratamiento de leucemias resistentes a quimioterapia.