Alteraciones mitocondriales mediadas por PSC833 y Ciclosporina A durante la apoptosis en líneas resistentes a multidrogas

LOPES EC; GARCÍA MG; BUSTAMANTE J; LUZZI R; ALVAREZ E; HAJOS S

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Reunión Científica Anual de SAIC y SAI; 2002

SASIC y SAI

Previamente demostramos que CsA y su análogo PSC 833 utilizados en baja concentración (0.1 ug/ml) fueron capaces de revertir el fenotipo MDR, mientras que en alta concentración (1 ug/ml) indujeron apoptosis independientemente de este fenotipo. CsA indujo apoptosis tanto en la línea sensible (LBR-), como en las resistentes a vincristina (LBR-V160) y doxorubicina (LBR-D160), mientras PSC 833 solo lo hizo en la línea LBR-V160. El objetivo de este trabajo fue evaluar el mecanismo involucrado en la apoptosis inducida por CsA y PSC 833. Analizamos las funciones mitocondriales a través de los cambios del potencial de su membrana y por liberación de citocromo c, seguido por activación de la cascada de caspasas. Utilizando las sondas JC-1 y DiOC6 encontramos que ambas drogas indujeron apoptosis asociada a la despolarización mitocondrial; posterior al tratamiento con CsA se observó un aumento del citocromo c citosólico  de 2.61 para LBR-, 1.98 para LBR-V160 y 3.01 para LBR-D160 mientras que PSC 833 produjo un aumento de 1.15 para LBR-V160 (células tratadas vs. no tratadas, evidenciado por western blot). En forma paralela por fluorometría demostramos la activación de la caspasa 3, pero no de las caspasas 6 y 8. Estos resultados sugieren que los eventos mitocondriales cumplen un importante papel en el proceso apoptótico inducido tanto por CsA como por PSC 833 en las líneas en estudio.