Expresión constitutiva de NFkB en un linfoma murino: regulación del crecimiento por BAY 11-7082 mediante la inducción de apoptosis

GRECZANIK S; GARCÍA MG; ALANIZ L; CAVALIERE V; LUZZI R; HAJOS S; ALVAREZ E

Mar del Plata, Argentina

Congreso; XLVIII Reunión Anual de la SAIC y LI Reunión Anual de la SAI; 2003

SAIC y SAI

El linfoma LB es un desorden linfoproliferativo murino que se caracteriza por su alto grado de invasividad y su incapacidad de inducir una respuesta inmune efectiva.  La expresión constitutiva de mensajeros para citoquinas y especialmente la expresión de la molécula CD25 nos llevaron a analizar la activación del factor NFkB, su modulación por inhibidores selectivos y sus efectos sobre  la apoptosis celular. La activación del factor NFkB, se estudio por ensayos de EMSA y supershift en el tumor primario y la línea derivada LB02, demostrándose  una  expresión activa a nivel nuclear del mismo  constituida por las proteínas p50 y p65. La activación fue completamente inhibida por tratamiento durante 1h con BAY 11-7082 10 mM y parcialmente por CAPE. Cuando se analizó el efecto de AZT, éste fue activo a altas cc.100-200mM únicamente sobre la línea  LB02. El tratamiento de LB02 con BAY 11-7082 10 mM produjo a las 24hs, una inhibición de la capacidad proliferativa del 64.0 + 28.1% con respecto de las células no tratadas (p<0.05), medido por incorporación de timidina tritiada. Cuando se correlacionó este efecto con la inducción de apoptosis, se encontró que la droga fue capaz de producir dicho efecto a partir de 6 hs (% de apoptosis 55.5+12.8 vs 7.2+1.8 del control p<0.01) con un máximo de acción a las 24hs (% de apoptosis 70.1+0.8 vs 5.8+0.8 del control p<0.001). El tratamiento de las células con AZT (100-200mM) solo o en combinación con IFNa no produjo resultados significativos. Concluimos que en el tumor LB y líneas derivadas existe una activación constitutiva del factor de transcripción NFkB ( heterodímero p50/p65), el que podría ser responsable de la sobrevida celular. El tratamiento con el inhibidor específico  de la kinasa de IkBa (BAY 11-7082) es capaz de anular completamente dicha activación, produciendo una disminución de la capacidad proliferativa de las células e induciendo la apoptosis celular.