INVESTIGADORES
GARCIA Mariana Gabriela
congresos y reuniones científicas
Título:
Los anticuerpos específicos frente a Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis de bovinos infectados incrementan la activación de NFkB de macrófagos bovinos
Autor/es:
MUNDO S; GARCÍA MG; DURRIEU M; GENTILINI E; ALVAREZ E; HAJOS S
Lugar:
Mar del Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004
Institución organizadora:
SAIC, SAI, SAFE, SAN, SABiofísica, SAF
Resumen:
La paratuberculosis es una enteritis granulomatosa crónica que afecta a bovinos, producida por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). Map puede sobrevivir y replicar dentro de macrófagos. La producción de anticuerpos (Ac) se incrementa sólo en los últimos estadíos. Entre los componentes del Map, la proteína p34 es inmunodominante para linfocitos B bovinos. Para determinar si los Ac específicos frente a Map y p34 pueden modular el curso de la patogénesis de Map, estudiamos su efecto en la interacción entre la bacteria y macrófagos. Se obtuvieron Ac de bovinos naturalmente infectados (5), vacunados con Map inactivado (3), vacunados con la proteína p34 (3) y controles negativos sanos. Los Ac fueron aislados y purificados por afinidad utilizando columnas de Map y p34. Los Ac fueron titulados por ELISA y caracterizados sus isotipos. Los Map fueron opsonizados con los diferentes Ac y se infectaron cultivos de una línea de macrófagos bovinos (BoMac) durante 30 min. A 37ºC. Se obtuvieron extractos nucleares y se evaluó activación de NFkB por retardo de movilidad eletroforética. Los valores de endotoxinas en todos los Ac fueron similares (2-8 UE). La especificidad se analizó por competencia con sonda fría y las subunidades se identificaron con anticuerpos anti-p50 y p65. Las BoMac expresan un nivel de activación de NFkB basal. Los Ac provenientes de bovinos infectados incrementaron la activación de NFkB nuclear, mientras que los Ac proveniente de bovinos vacunados con Map o p34 no modificaron el nivel basal de activación de las BoMac. El incremento de activación de NFkB observado sólo en los Ac de bovinos infectados indicaría que existen diferencia entre la funcionalidad de los Ac producidos por animales que responden a la infección bacteriana y de aquellos inducidos por bacteria inactivado o una proteína bacteriana como la p34.