Una mayor capacidad proliferativa y menor inducción de especies reactivas de oxígeno protegen de la fibrosis hepática a ratones knockout para SPARC (Secreted Protein, Acidic and Rich in Cysteine).

PEIXOTO E ; ATORRASAGASTI C; REAL A; RODRIGUEZ M; MALVICINI M; GARCIA M; FIORE E; CORRALES F; MAZZOLINI G

Congreso; LX Reunión Anual de la SAIC; 2015

SPARC es una glicoproteína matricelular involucrada en diversosprocesos biológicos, entre los que se encuentra la fibrogénesishepática. Hemos demostrado previamente en un modelo de fibrosishepatica avanzada inducido por tioacetamida (TAA) que la ausenciade SPARC tiene un rol protector en la generación de fibrosis. Con elfin de estudiar los mecanismos involucrados en la protección de lafibrosis en ausencia de SPARC se realizó un análisis de los cambiosde la expresión génica utilizando la plataforma de microarrays y de laexpresión de proteínas utilizando 2D-DIGE sobre muestras hepáticasprovenientes de ratones SPARC+/+ y SPARC-/- tratados 10 semanascon TAA. Para confirmar los resultados obtenidos se realizaronensayos de immunohistoquímica y qPCR para PCNA a 24 horas detratamiento con TAA. Asimismo, se obtuvieron cultivos primarios dehepatocitos provenientes de ratones SPARC+/+ y SPARC-/- y seevaluaron los niveles de especies reactivas del oxígeno (ROS)utilizando dichlorofluoresceina (DCFH) tanto en citometria como asítambién con microscopia de fluorescencia a las 3 horas de laadministración de TAA. El análisis proteómico mostro un aumento deproteínas involucradas con la detoxificación de especies reactivas deloxígeno (catalasa, peroxirredoxina-1 y glutation-S-Transferasa P1 yMu1) en los ratones SPARC-/- tratados con TAA, mientras que elestudio genómico mostro que a las 10 semanas luego de tratamientocon TAA los ratones SPARC-/- presentaban un incremento en laexpresión de genes relacionados con la reparación de ADN y laproliferación celular. Los ratones SPARC-/- mostraron un incrementosignificativo de PCNA a las 24 horas tanto en los niveles de expresióngénica como de proteínas. Asimismo, los niveles de especiesreactivas del oxigeno fueron menores en los hepatocitos provenientesde ratones SPARC-/- que en los SPARC+/+ tratados con TAA. Laausencia de SPARC tiene un rol protector ante un estímulo fibrogénicocomo la TAA. Esta protección podría deberse, al menos en parte, auna mayor capacidad proliferativa de los hepatocitos y a una menorinducción de especies reactivas del oxígeno.