INVESTIGADORES
GARCIA Mariana Gabriela
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio del comportamiento de células estromales mesenquimales en el microambiente de las metástasis hepáticas de cáncer de colon experimental.
Autor/es:
GOMEZ BUSTILLO S; FIORE EJ; RODRIGUEZ M; PEIXOTO E; ATORRASAGASTI C; MALVICINI M; MAZZOLINI G; GARCIA MG
Reunión:
Congreso; XVIII Congreso Argentino de Hepatología; 2015
Resumen:
Introducción: El carcinoma colorectal (CRC) es la tercer causa más frecuente de cáncer y las metástasis hepáticas están presentes en cerca del 15-25% de los pacientes al momento del diagnóstico. El único tratamiento con intención curativa es la cirugía, que puede aplicarse a una minoría de pacientes. En la búsqueda de nuevas opciones terapéuticas surge la terapia génica y celular. Las células estromales mesenquimales adultas (MSCs) son capaces de migrar hacia el ambiente tumoral en respuesta a factores producidos por el tumor, convirtiéndolas en una herramienta muy valiosa para el transporte de genes terapéuticos. Existen evidencias que indican que el comportamiento y funcionalidad de las MSCs dependerá del microambiente donde se encuentren. Objetivo: el objetivo de este trabajo es evaluar el efecto del microambiente tumoral (modelo de metástasis hepáticas de cáncer de colon) sobre las MSCs, estudiando un ambiente considerado inmunosupresor y otro que demostramos previamente que favorece la respuesta antitumoral, generado por el tratamiento combinado de ciclofosfamida (Cy) y un adenovirus que expresa la citoquina inmunoestimuladora IL-12 (IL-12). Materiales y métodos: se inocularon células de adenocarcinoma de colon murino CT26 (5 x105/animal) por vía intrahepática en ratones macho adultos Balb/c (día 0). Los animales se distribuyeron en 2 grupos (n=8/grupo): grupo tratado con Cy (dosis única de 50 mg/Kg, i.p/día 7) más AdIL-12 (dosis única, 109 PFU, i.v/24hs post-Cy) y grupo control que no recibió el tratamiento. Se sacrificaron los animales 7 días después del tratamiento (día 14) y se tomaron muestras del tumor. Se dividió el tumor en fragmentos para aislar mRNA y evaluar la expresión de genes por qPCR y para generar medios condicionados (MC), incubando pequeños fragmentos de este tumor en medio de cultivo durante 24 horas. Los MC fueron utilizados para evaluar la migración in vitro sobre las MSCs de ratón y para estimular a las MSCs y luego evaluar la expresión de genes por qPCR en las MSCs. Resultados: Se observó que ambos MC fueron capaces de inducir la migración in vitro de las MSCs. La evaluación de los genes expresados en el tumor indicó que el microambiente tumoral proveniente de los tumores tratados (TT) presentó menores niveles de VEGF, IL-6 y HIF-1 y mayores niveles IP-10 que los tumores control (TC), indicando que ambos microambientes tumorales presentaron diferentes características de expresión génica. Por otro lado, la incubación con el MC de los TT indujo la expresión de IL-8 e IP-10 y disminuyó la expresión de IL-6 en las MSCs en comparación con los MC de los TC, corroborando la hipótesis que el microambiente tumoral puede condicionar el comportamiento de las MSCs. Conclusiones: Los factores producidos por el medio condicionado del TT indujo un fenotipo sobre las MSCs que condicionaria una mejor respuesta antitumoral. Estos resultados nos permitirán seguir estudiando a las MSCs como posibles co-adyuvantes del tratamiento, especialmente en combinación con la Cy e IL-12.