Análisis molecular de la expresión y participación de enzimas de síntesis de gangliósidos en embriones de Xenopus laevis

M. E. MÓNACO; M. AYBAR; A. FUENTES; C. TRÍBULO; S. SÁNCHEZ

Tafí del Valle, Tucumán

Jornada; XVIII Jornadas Científicas Sociedad de Biología de Tucumán; 2001

Asociación de Biología de Tucumán

Los glicoesfingolípidos, y en particular los ganliósidos, son moléculas antipáticas presentes en todas las células eucariotas. Se localizan exclusivamente en la hoja externa de la membrana plasmática por lo que se encuentran en situación óptima para participar en las interacciones célula-célula y célula-matriz extracelular. En trabajos anteriores, llevados a cabo en embriones de Bufo arenarum, hemos puesto de manifiesto la presencia de gangliósidos, analizado la expresión de diferentes gangliósidos y estudiado su biosíntesis. En el presente trabajo se analiza por RT-PCR (transcripción reversa-reacción en cadena de la polimerasa) e hibridación in situ la expresión del mRNA de la primera enzima involucrada en la síntesis de glicoesfingolípidos, la glucosil ceramida transferasa, en los principales estadios del desarrollo del embrión de Xenopus laevis. La actividad de las enzimas de síntesis de gangliósidos tiene un efecto directo sobre la composición de estas moléculas en la membrana plasmática, donde ejercen su acción. Con el objeto de establecer la participación de gangliósidos en las interacciones celulares del desarrollo embrionario se llevó a cabo la sobrexpresión de las enzimas GD3 sintasa, GM1 sintasa y Gm2 sintasa, a través de las microinyección de mRNA obtenido por transcripción in vitro en embriones tempranos. Se analizaron los efectos de la sobrexpresión sobre diferentes marcadores moleculares tejido y estadio específicos. La sobrexpresión de GD3 sintasa y GM2 sintasa produjo una expansión del territorio mesodérmico y una reducción del territorio de crestas neurales, mientras que GM1 sintasa produjo además un marcado efecto sobre el territorio de glándula de cemento. Los cambios en las actividades de las principales enzimas de las vías de síntesis de gangliósidos sugieren la participación de estas moléculas en procesos fundamentales del desarrollo del embrión de anfibio.