EL DESEMPEÑO DE DIFERENTES METODOS DE PCRS EN EL DIAGNOSTICO DE LEISHMANIASIS TEGUMENTARIA AMERICANA

HOYOS, C; UNCOS, A; CAJAL, SP; JUAREZ, M; ALMAZAN, C; BRACAMONTE, ME; MOYA ALVAREZ, AGUSTIN; GIL, JF; NASSER, JR; MARCO, JD

Santa Fe

Encuentro; XXVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2016

Sociedad Argentina de Protozoología

La leishmaniasis tegumentaria (LT) es una enfermedad parasitaria endémica en nortede la provincia de Salta, causada principalmente por Leishmania (Viannia)braziliensis. El diagnóstico se realiza por identificación de amastigotes en frotisde lesiones teñidos con Giemsa, características clínicas de las lesiones, datosepidemiológicos y la Intradermo reacción de Montenegro. El objetivo de estetrabajo fue evaluar el desempeño diagnóstico de 2 PCR que amplifican fragmentosde 700 (PCR1) y 120 pb (PCR2) de ADN de kinetoplasto (ADNk) de Leishmania sp.,sobre hisopados de borde de lesiones. La extracción de ADN parcialmente purificadose realizó mediante sucesivos lavados con buffer de lisis y posteriorincubación con proteinasa K, de acuerdo al método descripto por Higuchi (1989).Se utilizó una dilución 1/10 como templado para la amplificación. Se calculóvalores de sensibilidad (S), especificidad (E) y valores predictivos negativos(VPN) y positivos (VPP) de cada PCR con relación a la presencia o ausencia deenfermedad de acuerdo a la combinación de resultados de los distintos métodosutilizados para diagnóstico. El grado de concordancia entre los métodosutilizados fue determinado mediante el Índice kappa de Cohen. Se procesaron 68 muestrasde pacientes con lesiones en los que se requirió el diagnostico diferencial deleishmaniasis entre Diciembre de 2013 y Julio de 2015. El 88% corresponden asexo masculino y 18% a sexo femenino, la mediana de edad fue de 42 años. Losvalores de S, E, VPP y VPN para PCR1 fueron de 44,2%, 92%, 90,5% y 48,9% y paraPCR2 de 79%, 100%, 100% y 72% respectivamente. El valor de coeficiente de Kappacalculado teniendo en cuenta los resultados de frotis, IDRM y de las 2 PCR fuede 0,53 (p< 0,001). Los indicadores de desempeño diagnóstico obtenido paralas PCRs aplicadas individualmente tienen altos valores de especificidad, sinembargo la PCR1 presenta una menor sensibilidad que podría estar relacionado condificultades en la amplificación de grandes fragmentos de ADN. Para aumentar laeficacia diagnostica global de los casos, es necesario desarrollar e incluirdiferentes o nuevos criterios al diagnóstico de esta patología.